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注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
50T腦膜炎奈瑟菌血清群BPCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
BH-P63354 |
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒 cmDNA ELISA Kit 9號(hào)染色體開放閱讀框62抗體英文名稱:C9orf62 0.2ml
人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒 AGPA/PCA ELISA Kit 9號(hào)染色體開放閱讀框64抗體英文名稱:C9orf64 0.2ml
人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒 ARA ELISA Kit 9號(hào)染色體開放閱讀框66抗體英文名稱:C9orf66 0.2ml
人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒 SDA ELISA Kit 9號(hào)染色體開放閱讀框68抗體英文名稱:C9orf68 0.2ml
人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA試劑盒 DNP-Ab ELISA Kit 9號(hào)染色體開放閱讀框7抗體英文名稱:C9orf7 0.2ml
人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA試劑盒 PsmAb ELISA Kit 9號(hào)染色體開放閱讀框71抗體英文名稱:C9orf71 0.2ml
人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒 MCV ELISA Kit K-酪蛋白抗體英文名稱:Casein Kappa 0.1ml
人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(anti-MCV Ab)ELISA試劑盒 anti-MCV Ab ELISA Kit 20號(hào)染色體開放閱讀框26抗體英文名稱:C20orf26 0.2ml
人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒 aZP ELISA Kit C2CD4D蛋白抗體英文名稱:C2CD4D 0.2ml
人抗天然脫氧核糖核酸抗體(n-DNA-Ab)ELISA試劑盒 n-DNA-Ab ELISA Kit 二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白5抗體英文名稱:CXXC5 0.2ml
人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒 GP ELISA Kit L-型電壓依賴型鈣通道β抗體英文名稱:CACNB2 0.1ml
人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒 MAG Ab ELISA Kit 過氧化氫酶抗體英文名稱:Catalase 0.1ml
人抗髓磷脂抗體IgA(anti-myelin Ab)ELISA試劑盒 anti-myelin Ab ELISA Kit 細(xì)胞色素P450 2C19抗體英文名稱:CYP2C19 0.2ml
人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒 dsDNA ELISA Kit CD161抗體英文名稱:CD161 0.1ml
人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒 AMA IgA ELISA Kit 心肌特異性肌鈣蛋白T抗體英文名稱:Troponin T 0.1ml
50T腦膜炎奈瑟菌血清群BPCR檢測(cè)試劑盒商陸皂苷T Esculentoside T 20mg
4'-O-甲基補(bǔ)骨脂查耳酮B 4'-O-Methylbroussochalcone B 20784-60-5 10mg
(7S,7'R)-雙(3,4-亞甲二氧苯基)-rel-(8R,8'R)-二甲基四氫呋喃 rel-(8R,8'R)-dimethyl-(7S,7'R)-bis(3,4-methylenedioxyphenyl)tetrahydro-furan 178740-32-4 10mg
異補(bǔ)骨脂色烯查耳酮 4-Hydroxylonchocarpin 56083-03-5 10mg
當(dāng)歸?;昝仔?/span>H Angeloylgomisin H 66056-22-2 10mg
甲基麥冬黃烷酮A Methylophiopogonanone A 74805-92-8 10mg
5,7,4'-三羥基-8-甲基二氫黃酮 5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone 916917-28-7 5mg
苦玄參苷IB Picfeltarraenin IB 97230-46-1 10mg
蘆薈苷B Aloin B 28371-16-6 10mg
硫酸天仙子胺水合物 Hyoscyamine sulfate hydrate 620-61-1 20mg
牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷 Arctigenin 4'-O-β-gentiobioside 41682-24-0 5mg
羅漢松樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷 Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside 106647-14-7 5mg
7-O-甲基蘆薈新甙A 7-O-Methylaloeresin A 329361-25-3 5mg