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服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T假結核耶爾森菌PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63502 |
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。
5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產品只能用于科研。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
生長因子(GH)ELISA試劑盒 GH ELISA Kit 細胞周期蛋白N端結構域蛋白1抗體英文名稱:CNTD 0.2ml
生長調節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒 GROα/CXCL1/MGSA ELISA Kit 膽固醇25羥化酶抗體英文名稱:CH25H 0.2ml
神經趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒 fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族抗體英文名稱:Caspase-1 p20 0.1ml
前動力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)ELISA試劑盒 PROK1/EG-VEGF ELISA Kit 鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結合蛋白8抗體英文名稱:Calneuron 1 0.2ml
凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)ELISA試劑盒 LOX-1 ELISA Kit 鈣結合蛋白5/3抗體英文名稱:CABP5 0.2ml
苗條素受體(Leptin receptor)ELISA試劑盒 Leptin receptor ELISA Kit CD98輕鏈抗體英文名稱:SLC7A5 0.1ml
苗條素(OB)ELISA試劑盒 OB ELISA Kit 胰輔脂酶抗體英文名稱:CLPS 0.2ml
苗條素(LEP)ELISA試劑盒 LEP ELISA Kit 17號染色體開放閱讀框104抗體英文名稱:C17orf104 0.2ml
粒細胞趨化蛋白2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒 GCP-2/CXCL6 ELISA Kit 卡因和****調節(jié)轉錄蛋白抗體英文名稱:CART 0.2ml
粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒 GMCSF/CSF2 ELISA Kit 富半胱氨酸肝素結合蛋白61抗體英文名稱:CCN1 0.1ml
可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒 ENG/sCD105 ELISA Kit 2號染色體開放閱讀框65抗體英文名稱:C2orf65 0.2ml
可溶性CD80(sCD80/B7-1)ELISA試劑盒 sCD80/B7-1 ELISA Kit β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體英文名稱:CTNNBL1 0.2ml
可溶性CD80(sCD80)ELISA試劑盒 sCD80 ELISA Kit 陽離子轉運調控樣蛋白1抗體英文名稱:CHAC1 0.2ml
巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit DNA斷裂因子相似蛋白B抗體英文名稱:CIDE B 0.2ml
巨細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒 GM-CSF ELISA Kit DNA斷裂因子相似蛋白A抗體英文名稱:CIDE A 0.2ml
50T假結核耶爾森菌PCR檢測試劑盒5nmol 接頭DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I接頭) Adaptors -20℃保存
5nmol 接頭DNA(EcoR I-Sma I) Adaptors -20℃保存
5nmol 接頭DNA(Hind Ⅲ-Sma I) Adaptors -20℃保存
5nmol 接頭DNA(Sal I-Sma I) Adaptors -20℃保存
5nmol 接頭DNA(pSma I) Adaptors -20℃保存
1nmol EcoR I-Not I-BamH I接頭 EcoR I-Not I-BamH I Adaptors -20℃保存
1mL Oligo快速復性液,10× Oligo Rapid Renaturing Solution -20℃避光保存
20次 裂殖酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒(無高效轉化液) S. pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit 常溫
20次 裂殖酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒(含高效轉化液) S. pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit 常溫
20次 酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒(無高效轉化液) Yeast Chemical Competent Cell
Preparation Kit 常溫
20次 酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒(含高效轉化液) Yeast Chemical Competent Cell
Preparation Kit 常溫
20次 酵母電轉感受態(tài)細胞制備試劑盒 Yeast Electro Competent Cell
Preparation Kit 常溫
20次 高效E.coli感受態(tài)細胞制備試劑盒 High Efficiency E.coli Competent Cell Preparation Kit 低溫
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。