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原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:50T變形桿菌PCR檢測試劑盒
貨號:BH-P63507
規(guī)格:50T
分類:熒光PCR 法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
實(shí)驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
白細(xì)胞介素5(IL-5)ELISA試劑盒 IL-5 ELISA Kit C-藻藍(lán)素/藻藍(lán)蛋白/藻青蛋白抗體英文名稱:c-phycocyanin 0.2ml
白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒 IL-4 ELISA Kit 細(xì)胞色素P450 1A1抗體英文名稱:CYP1A1/AHRR 0.1ml
白細(xì)胞介素3(IL-3)ELISA試劑盒 IL-3 ELISA Kit 絲/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶II α抗體英文名稱:CK II alpha 0.2ml
白細(xì)胞介素27(IL-27)ELISA試劑盒 IL-27 ELISA Kit 2號染色體開放閱讀框66抗體英文名稱:C2orf66 0.2ml
白細(xì)胞介素24(IL-24)ELISA試劑盒 IL-24 ELISA Kit CULLIN抗體英文名稱:Cullin 0.2ml
白細(xì)胞介素20(IL-20)ELISA試劑盒 IL-20 ELISA Kit 小牛胸腺DNA抗體英文名稱:calf thymus DNA 0.2ml
白細(xì)胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒 IL-2 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框226抗體英文名稱:C1orf226 0.2ml
白細(xì)胞介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒 IL-1RA ELISA Kit 組織蛋白酶L抗體英文名稱:Cathepsin L 0.1ml
白細(xì)胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 IL-1β ELISA Kit 絲/蘇氨酸蛋白激酶II β抗體(casein kinase IIβ)英文名稱:CK II beta 0.1ml
白細(xì)胞介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 IL-1B ELISA Kit 細(xì)胞角蛋白18抗體英文名稱:CK18 0.1ml
白細(xì)胞介素1α(IL-1α/IL-1F1)ELISA試劑盒 IL-1α/IL-1F1 ELISA Kit 轉(zhuǎn)化生長因子β1結(jié)合蛋白抗體英文名稱:CD109 0.1ml
白細(xì)胞介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 IL-1α ELISA Kit 22號染色體開放閱讀框45抗體英文名稱:C22orf45 0.2ml
白細(xì)胞介素18(IL-18)ELISA試劑盒 IL-18 ELISA Kit 22號染色體開放閱讀框32抗體英文名稱:C22orf32 0.2ml
白細(xì)胞介素16(IL-16)ELISA試劑盒 IL-16 ELISA Kit CD6抗體英文名稱:CD6 0.2ml
白細(xì)胞介素17(IL-17)ELISA試劑盒 IL-17 ELISA Kit CD5L抗體英文名稱:CD5L 0.2ml
50T變形桿菌PCR檢測試劑盒50次 菌落PCR試劑盒2.0 Colony PCR Kit 2.0 -20℃保存
2.5g IPTG干粉 IPTG Powder -20℃保存
1.5mL IPTG溶液 IPTG Solution -20℃保存
0.5mL X-Gal干粉 X -Gal Powder -20℃避光保存
10mL X-Gal溶液,20mg/mL X -Gal Solution -20℃避光保存
1000次 免質(zhì)粒提取篩選試劑盒 Single Colony Screening Kit -20℃保存
100mL 超級培養(yǎng)基 Super LB Medium 4℃保存,其中成分二-20℃保存,有效期一年。
250g 干粉型LB培養(yǎng)基 LB Medium Powder 常溫
250g 干粉型LB-Lennox培養(yǎng)基 LB-Lennox Medium Powder 常溫
250g 干粉型2×YT培養(yǎng)基 2×YT Medium Powder 常溫
250g 干粉型SB培養(yǎng)基 SB Medium Powder 常溫
250g 干粉型SOB培養(yǎng)基 SOB Medium Powder 常溫
250g 干粉型SOC培養(yǎng)基 SOC Medium Powder 常溫
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。