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服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T嗜吞噬細胞無形體PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63574 |
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
應激誘導磷蛋白1(STIP1)ELISA試劑盒 STIP1 ELISA Kit 補體C1RL鏈多肽抗體英文名稱:C1RL 0.2ml
營養(yǎng)蛋白(TRO)ELISA試劑盒 TRO ELISA Kit 周期素M2抗體英文名稱:Cyclin M2 0.2ml
隱花色素2(CRY2)ELISA試劑盒 CRY2 ELISA Kit 周期素T2抗體英文名稱:Cyclin T2 0.2ml
隱花色素1(CRY1)ELISA試劑盒 CRY1 ELISA Kit 周期素K抗體英文名稱:Cyclin K 0.2ml
吲哚乙胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(INMT)ELISA試劑盒 INMT ELISA Kit 抗肽CAMP抗體英文名稱:Cathelicidin 0.1ml
陰離子/糖轉(zhuǎn)運蛋白(AST)ELISA試劑盒 AST ELISA Kit 5號染色體開放閱讀框4抗體英文名稱:C5ORF4 0.2ml
易位關聯(lián)膜蛋白1(TRAM1)ELISA試劑盒 TRAM1 ELISA Kit 4號染色體開放閱讀框44抗體英文名稱:C4orf44 0.2ml
易位蛋白1(TLOC1)ELISA試劑盒 TLOC1 ELISA Kit 4號染色體開放閱讀框33抗體英文名稱:C4orf33 0.2ml
抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒 INHBP ELISA Kit 4號染色體開放閱讀框42抗體英文名稱:C4orf42 0.2ml
抑制素βE(INHβE)ELISA試劑盒 INHβE ELISA Kit 5號染色體開放閱讀框33抗體英文名稱:C5ORF33 0.2ml
抑制素βC(INHβC)ELISA試劑盒 INHβC ELISA Kit 9號染色體開放閱讀框89抗體英文名稱:C9orf89 0.2ml
抑制素βB(INHβB)ELISA試劑盒 INHβB ELISA Kit 19號染色體開放閱讀框66抗體英文名稱:C19orf66 0.1ml
抑制素βA(INHβA)ELISA試劑盒 INHβA ELISA Kit 21號染色體開放閱讀框55抗體英文名稱:C21orf55 0.2ml
抑制蛋白β2(ARRβ2)ELISA試劑盒 ARRβ2 ELISA Kit 胱抑素A/半胱氨酸蛋白酶抑制劑A抗體英文名稱:Cystatin A 0.1ml
抑制素B(INHB)ELISA試劑盒 INHB ELISA Kit 21號染色體開放閱讀框70抗體英文名稱:C21orf70 0.2ml
50T嗜吞噬細胞無形體PCR檢測試劑盒10mL 長效期SDS-PAGE還原劑 SDS-PAGE Reducing Agent 4℃保存
1mL 長效期SDS-PAGE上樣液 Stable SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存
20L 長效期SDS-PAGE電泳液(干粉)(適合30 KD以上蛋白) Stable SDS-PAGE Running Buffer 常溫保存
20L 長效期SDS-PAGE電泳液(干粉)(適合2-30 kD蛋白) Stable SDS-PAGE Running Buffer 常溫保存
30次 一站式Tricine-SDS-PAGE套裝 One-Stop Tricine-SDS-PAGE Pack 常溫保存(上樣液需要-20℃保存)
30次 一站式Blue Native PAGE電泳套裝
30次 一站式CTAB-PAGE電泳套裝
30次 一站式乙酸-尿素PAGE電泳套裝
250mL Tricine-SDS-PAGE配膠液 Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer 常溫保存
1000mL Tricine-SDS-PAGE配膠液 Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer 常溫保存
1mL Tricine-SDS-PAGE上樣液 Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存
5mL Tricine-SDS-PAGE上樣液 Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存
10L Tricine-SDS-PAGE陽極電泳液(干粉) Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer 常溫保存
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。