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服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T肺炎支原體(MP)PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P64062 |
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
原鈣粘蛋白γA9抗體英文名稱:PCDHGA9 0.2ml
原鈣粘蛋白γA11抗體英文名稱:PCDHGA11 0.2ml
原鈣粘蛋白γA12抗體英文名稱:PCDHGA12 0.2ml
原鈣粘蛋白β12抗體英文名稱:PCDHB12 0.2ml
原鈣粘蛋白β3抗體英文名稱:PCDHB3 0.2ml
原鈣粘蛋白γB1抗體英文名稱:PCDHGB1 0.2ml
原鈣粘蛋白γB2抗體英文名稱:PCDHGB2 0.2ml
原鈣粘蛋白γB4抗體英文名稱:PCDHGB4 0.2ml
原鈣粘蛋白γB6抗體英文名稱:PCDHGB6 0.2ml
原鈣粘蛋白γC3抗體英文名稱:PCDHGC3 0.2ml
原鈣粘蛋白γC4抗體英文名稱:PCDHGC4 0.2ml
磷酸蛋白聚糖PTPRZ抗體英文名稱:PTP zeta 0.2ml
神經(jīng)特異蛋白酪氨酸磷酸酶N5抗體英文名稱:PTPN5/STEP 0.2ml
孕受體抗體英文名稱:progesterone receptor 0.1ml
足細胞表達蛋白/轉錄因子21抗體英文名稱:POD1 0.1ml
50T肺炎支原體(MP)PCR檢測試劑盒山梨醇麥康凱瓊脂基礎(SMAC) 用于致病性大腸桿(包括O157:H7)的分離培養(yǎng)(SN/T0973-2000和SN/T 1827-2006 )。 250g
山梨醇麥康凱瓊脂平板 用于致病性大腸桿(包括O157:H7)的分離培養(yǎng)。 90mmX20個
山梨醇生化鑒定管 生化鑒定 20支/盒
山梨糖 生化鑒定 20支/盒
生理鹽水 用作稀釋液。 225ml/X10袋
濕熱指示膠帶 將未滅與滅的物品區(qū)分開、蒸汽膠帶滅后由白色變?yōu)楹谏?/span> 18mm*55mm
十六烷基溴化銨培養(yǎng)基 用于綠膿桿及其它革蘭氏陰性非發(fā)酵的選擇性分離培養(yǎng)(GB15979-2002,化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗... 100g
十六烷基溴化銨瓊脂 用于綠膿桿及其它革蘭氏陰性非發(fā)酵的選擇性分離培養(yǎng)。(GB) 250g
十六烷基溴化銨瓊脂 用于綠膿桿及其它革蘭氏陰性非發(fā)酵的選擇性分離培養(yǎng)。(GB) 100g
十六烷基溴化銨瓊脂平板 用于綠膿桿及其他革蘭氏陰性非發(fā)酵的選擇性分離培養(yǎng)。 90mmX20個
嗜熱乳酸鏈球生化鑒定盒 用于嗜熱乳酸鏈球的生化鑒定 7種×10次/盒
嗜熱脂肪桿恢復瓊脂培養(yǎng)基 用于滅與**鑒定試驗。(WS) 250g
鼠李糖生化鑒定管 生化鑒定 20支/盒
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。