試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準備：
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴格按照相關標準進行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴格地反復地檢測，我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱，已復溶但未用完的標準品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測，且加入試劑的順序應保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結果準確，每次檢測均需做標準曲線。

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
N-亞硝基0.999 100mg

效0.998 10mg

殺草強0.999 250mg

2-甲基/鄰0.995 500mg

氟米松(含干冰運輸費)0.986 100mg

1,2-二氯(含干冰運輸費)0.995 1g

托滅酸0.98 100mg

4-甲基-1-戊0.987 1mL

維生素A酸0.999 250mg

丙草丹-茵草敵0.983 100mg

5-甲基-2-0.993 250mg分泌素受體抗體

肌聚多糖-β抗體

分泌型球蛋白A抗體

可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白SLC24A5抗體

硒蛋白W抗體

干細胞生長因子抗體

臂板蛋白3A抗體

基質(zhì)細胞衍生因子－1抗體

臂板蛋白3F抗體

臂板蛋白4C抗體

富含脯氨酸突觸相關蛋白SHANK1抗體

鈉-糖共轉(zhuǎn)運載體1抗體

性結合球蛋白抗體

小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2）ⅡELISA KitAdenylate cyclase 1  腺苷酸環(huán)化酶1抗體 0.2ml

腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand (TRAIL)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

Cyclin A2/CCN1  周期素A2抗體 0.2ml

神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Elase, Neuron Specific (NSE)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

Phospho-Doublecortin (Ser297)  磷酸化雙皮質(zhì)素抗體 0.1ml

二肽基肽酶10(DPP10)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 10 (DPP10)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

E2F3  轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體 0.1ml

線粒體甘油-3-磷酸?；D(zhuǎn)移酶(GPAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Glycerol-3-Phosphate Acyltransferase, Mitochondrial (GPAM)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

CTHRC1  膠原三股螺旋重復蛋白1抗體 0.2ml

羧肽酶E(CPE)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Carboxypeptidase E (CPE)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

EXPB-2  植物延展素-β 1ml

皮膚衍生肽酶抑制因子3(PI3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Peptidase Inhibitor 3, Skin Derived (PI3)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)