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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:小鼠骨橋素(OPN)博湖ELISA試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:PM104250
  • 產(chǎn)品廠商:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
小鼠骨橋素(OPN)博湖ELISA試劑盒檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
詳情介紹:

我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

產(chǎn)品名稱

小鼠骨橋素(OPN)博湖ELISA試劑盒

英文名稱

Mouse Osteopontin,OPN ELISA Kit

貨號

PM104250

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。

樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

注意事項:

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2'-碘-1,1',3',1''-三聯(lián)分子式:356.2分子量: C18H13I英文名稱:2'- -1,1', 3', 1''- threeCAS號:82777-09-1

硬脂紅霉素英文名稱:Erythromycin stearateCAS號:643-22-1分子式:1018.4分子量: C37H67NO13· C18

(R)-(-)-1-芐-3-羥分子式:191.27分子量: C12H17NO英文名稱:(R) - (-) -1- -3- benzyl piperidineCAS號:91599-81-4

氘代對二氯分子式:151.03分子量: C6D4Cl2英文名稱:Deuterium substitution of twoCAS號:3855-82-1

4-硝分子式:153.14分子量: C6H7N3O2英文名稱:4- 4-dinitrophenylhydrazineCAS號:100-16-3

1,3,6,8-四溴咔分子式:482.8分子量: C12H5Br4N英文名稱:1,3,6,8- four carbazole bromideCAS號:55119-09-0

2--5-三氟甲分子式:186.13分子量: C8H5F3N2英文名稱:2- amino -5- cyano three fluorine tolueneCAS號:327-74-2

對溴氯分子式:191.45分子量: C6H4BrCl英文名稱:Of bromineCAS號:106-39-8

3,5-二溴甲分子式:249.93分子量: C7H6Br2英文名稱:3,5- dibromo tolueneCAS號:1611-92-3

甲橙英文名稱:Benzene methyl orangeCAS號:36402-77-4分子式:389.4分子量: C19H16N3NaO3S小鼠 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配對抗體

小鼠 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配對抗體

CNPY4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

CD8A / MAL ELISA配對抗體

Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-LGALS3 Immunomagnetic Beads IP    5 mL

EIF2S3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

ANPEP / CD13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

HSF1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

NODAL 基因全長ORF克隆

小鼠 CNDP2 / CPGL 基因全長ORF克隆

大鼠 RPAP3 基因全長ORF克隆

食蟹猴 CD200Rla 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠骨橋素(OPN)博湖ELISA試劑盒Rabbit Anti-human IgA  兔抗人球蛋白A 0.2ml

白介素10(IL10)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子2(NCF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Neutrophil Cytosolic Factor 2 (NCF2)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

Goat Anti-human IgM/Cy3  Cy3標(biāo)記的羊抗人IgM 0.1ml

神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Neurotrophin 3 (NT3)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

Mouse Anti-Rabbit IgM/FITC  FITC標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

糖抗原125(CA125)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Carbohydrate Antigen 125 (CA125)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

Rabbit Anti-Bov IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗牛IgG  0.1ml

間隙連接蛋白43(CX43)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Connexin 43 (CX43)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

Rabbit Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml

早期生長應(yīng)答因子1(EGR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Early Growth Response Protein 1 (EGR1)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

操作流程:
1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

 


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