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試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠三磷酸腺苷(ATP)免費代測ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Adenosine Triphosphate(ATP)ELISA Kit |
貨號 |
PM105064 |
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
大葉茜草素 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
2,3,5,4-四羥基二乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
梧桐子 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
乙酰蒲公英萜醇 英文名稱 Taraxeryl acetate 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥90%
黃芩素 英文名稱 黃芩苷元; 黃芩黃素 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: Baicalein
格列風內(nèi)酯 英文名稱 Griffonilide 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
硝基酰胺(丙胺雜質(zhì)A) 英文名稱 檢查用 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
洛伐他汀 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
阿司咪 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
青蒿 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
血清白蛋白(牛) 英文名稱 蛋白含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) Aloesin (1 mg)8-β-D-glucopyranosyl-7-hydroxy-5-methyl-2-(2-oxopropyl)-4H-1-benzopyran-4-one; Aloesin
Fluprostenol EIA Antiserum (500 dtn)Fluprostenol EIA Antiserum
N-Acetylagmatine (acetate salt) (1 mg)Monoacetylagmatine; N-(4-guanidinobutyl)acetamide acetate
DigitinDigitonin, Water-Soluble
(2E, 4E)-5-(Benzo[d][1,3]-dioxol-5-yl)-N-isobutylpenta-2,4-dienamidePipelonguminine
AB-PINACA RM (5 mg)(S)-N-(1-amino-3-methyl-1-oxobutan-2-yl)-1-pentyl-1H-indazole-3-carboxamide
MMB2201 (5 mg)I-AMB; methyl (1-(5-fluoropentyl)-1H-indole-3-carbonyl)-L-valinate
ADB-PINACA RM (1 mg)N-(1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)-1-pentyl-1H-indazole-3-carboxamide
(acetato-EUK-118
MS-1020 (1 mg)1-hydroxy-N-[2-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)ethyl]-2-naphthalenecarboxamide; MS-1020
Nexavar, SorafenibEZSolution BAY 43-9006
(T-4)-[(1E,6E)-1,7-Bis[4-(dimethylamino)phenyl]-1,6-heptadiene-3,5-dionato-kO3,kO5]difluoroboronCRANAD-2
小鼠三磷酸腺苷(ATP)免費代測ELISA Kit濾膜腸球瓊脂 現(xiàn)貨促銷 250(g)
正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒 英文名稱:Human regulated on activation in rmal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA Kit,48T/96T 進口/國產(chǎn)
CATC瓊脂 特價供應 250(g)
生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human growth-regulated oncogeneγ/melama growth stimulating activity,GROγ/MGSA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA Kit,48T/96T 進口/分裝
D/E中和瓊脂 現(xiàn)貨促銷 250(g)
廣譜細胞角蛋白(P-CK)ELISA試劑盒英文名稱:Human pan-cytokeratin,P-CK ELISA Kit規(guī)格:96T/48T牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA Kit,48T/96T 進口/國產(chǎn)
D/E中和肉湯 特價供應 250(g)
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)ELISA試劑盒 英文名稱:Human systemic lupus erythematosus,SLE ELISA Kit規(guī)格:96T/48T肺炎支原體抗體(MP-Ab)ELISA Kit,48T/96T 進口/分裝
AC肉湯 現(xiàn)貨促銷 250(g)
抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒英文名稱:Human Anti-nuclear Antibody,ANA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T核糖核酸酶(RNASE)ELISA Kit,48T/96T 進口/國產(chǎn)
標準2號營養(yǎng)瓊脂 特價供應 250(g)
抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒英文名稱:Human anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA Kit,48T/96T進口/分裝