咨詢電話:18117197628
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
我司主營(yíng)產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè),我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠趨化因子C-C-基元受體8(CCR8)ELISA試劑盒 |
英文名稱 |
Mouse Chemokine C-C-Motif Receptor 8(CCR8)ELISA Kit |
貨號(hào) |
PM105106 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶?jī)龈善贰?br>
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè),且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過(guò)程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請(qǐng)離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
苯甲酰愛(ài)康寧 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
水金鳳 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
洛緦 英文名稱 Rosin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥95%
P-氨基苯異丙酯 英文名稱 含量測(cè)定內(nèi)標(biāo)用 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
阿替洛爾 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
敵草快 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):6385-62-2 250mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào): 15545-48-9 250mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
合歡皮 英文名稱 中藥對(duì)照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
紫蘇葉 英文名稱 中藥對(duì)照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
荊芥穗 英文名稱 中藥對(duì)照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
鹽酸川芎嗪 英文名稱 Ligustrazine Hydrochloride 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%Rottlerin (10 mg)(2E)-1-[6-[(3-acetyl-2,4,6-trihydroxy-5-methylphenyl)methyl]-5,7-dihydroxy-2,2-dimethyl-2H-1-benzopyran-8-yl]-3-phenyl-2-propen-1-one; Mallotoxin|NSC 94525|NSC 56346; Rottlerin
Moxifloxacin (hydrochloride) (1 g)1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-7-[(4aS,7aS)-octahydro-6H-pyrrolo[3,4-b]pyridin-6-yl]-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid, monohydrochloride; Avelox|BAY 12-8039; Moxifloxacin (hydrochloride)
(-)-CP 47,497 (solution) (5 mg)2[(1S,3R)-3-hydroxycyclohexyl]-5-(2-methyloctan-2-yl)phenol; (-)-CP 47,497 (solution)
4(Z),7(Z),10(Z),13(Z),16(Z)-N-(2-hydroxyethyl)-Docosapentaenamide (1 mg)N-(2-hydroxyethyl)-4Z,7Z,10Z,13Z,16Z-docosapentaenamide; 4(Z),7(Z),10(Z),13(Z),16(Z)-N-(2-hydroxyethyl)-Docosapentaenamide
Dimethyl fumarate (500 mg)(2E)-1,4-dimethyl ester 2-butenedioic acid; NSC 167432|NSC 25942|trans-Butenedioic acid dimethyl ester; Dimethyl fumarate
硫代黃素T 超級(jí)純Thioflavin T UltraPure grade
Prostaglandin H2 (500 ug)9。alpha。,11。alpha。-epidioxy-15S-hydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; PGH2; Prostaglandin H2
5-trans U-44069 (1 mg)9,11-dideoxy-9。alpha。,11。alpha。-epoxymethano-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid; 5,6-trans U-44069; 5-trans U-44069
Pipeine (5 g)Biopeine|N-Pipeoylpipeidin|NSC 21727; (2E,4E)-5-(1,3-benzodioxol-5-yl)-1-(1-pipeidinyl)-2,4-pentadien-1-one
(±)-5-[4-(1-Methylcyclohexylmethoxy)benzyl]thiazolidine-2,4-dioneCiglitazone
EPZ5676 (25 mg)9-[5-deoxy-5-[[cis-3-[2-[6-(1,1-dimethylethyl)-1H-benzimidazol-2-yl]ethyl]cyclobutyl](1-methylethyl)amino]-β-D-ribofuranosyl]-9H-purin-6-amine
BriteRuler Pre-stained Protein LadderBriteRuler Pre-stained Protein Ladder
小鼠趨化因子C-C-基元受體8(CCR8)ELISA試劑盒YM11瓊脂基礎(chǔ) 現(xiàn)貨促銷 250(g)
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒英文名稱:Human Macrophage Inflammatory Protein-3β,MIP-3β ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
OGY瓊脂基礎(chǔ) 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human tumor specific transplantation antigen,TSTA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
WL營(yíng)養(yǎng)瓊脂 現(xiàn)貨促銷 250(g)
腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒英文名稱:Human Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor,TGSF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
沙氏BHI瓊脂 特價(jià)供應(yīng) 250(g)