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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)免費代測ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Actin Alpha 2, Smooth Muscle(ACTa2)ELISA Kit |
貨號 |
PM105136 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
膽石酸 英文名稱 檢查用 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
草燕滅一水合物 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:62059-43-2 250mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
鹽酸丙咪嗪 英文名稱 檢查用 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 0160-9602
桿肽 英文名稱 標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 效價測定
白術(shù) 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
貝美格 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 含量測定(HPLC)
利血平 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: HPLC法含量測定用
金絲桃素 英文名稱 Hypericin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥95%
大豆皂苷AA 英文名稱 Soyasaponin Aa 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
傘形花內(nèi)酯 英文名稱 Umbelliferone 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 98%
大車前苷 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) Topiramate (100 mg)2,3:4,5-bis-O-(1-methylethylidene)-β-D-fructopyranose 1-sulfamate; Topamax |TPM|Epitomax|McN 4853|RWJ 17021; Topiramate
DL-4662 (hydrochloride) (50 mg)1-(3,4-dimethoxyphenyl)-2-(ethylamino)pentan-1-one, monohydrochloride
Alendronate (sodium hydrate) (100 mg)P,P’-(4-amino-1-hydroxybutylidene)bis-phosphonic acid, monosodium salt trihydrate (1:1:3); Fosamax|MK-217|Adronat|G-70465Alendronate (sodium hydrate)
Teicoplanin Complex (100 mg)Antibiotic 8327A|Antibiotic MDL 507|MDL 507
Pseudolaric Acid B (10 mg)4a-(acetyloxy)-3-[(1E,3E)-4-carboxy-1,3-pentadien-1-yl]-3R,4S,4aS,5,6,9-hexahydro-3-methyl-1-oxo-7-methyl ester; 1H-4,9aR-ethanocyclohepta[c]pyran-7-carboxylic acid; PAB; Pseudolaric Acid B
PB-22 4-hydroxyquinoline isomer (1 mg)quinolin-4-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate; PB-22 4-hydroxyquinoline isomer
Mescaline (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)NSC 30419|TMPEA; 3,4,5-trimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride
熒光底物FAM-LETD-FMKFAM-LETD-FMK
Biotin-NHS (250 mg)6aR-hexahydro-2-oxo-2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl ester-1H-thieno[3aS,4-d]imidazole-4S-pentanoic acid; Biotin N-hydroxysuccinimide ester|NSC 345668; Biotin-NHS
GW 1929 (5 mg)N-(2-benzoylphenyl)-O-[2-(methyl-2-pyridinylamino)ethyl]-L-tyrosine
PROLI NONOate (50 mg)1-(hydroxy-NNO-azoxy)-L-proline, disodium salt; PROLI NONOate
(S)-N-(4-(2-((4-morpholinophenyl)amino)pyrimidin-4-yl)phenyl)pyrrolidine-2-carboxamideXL019
小鼠平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)免費代測ELISA Kit 胰蛋白胨大豆肉湯(TSB) 250g/瓶 用于細的增、培養(yǎng)特價供應(yīng)
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒英文名稱:Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4,TIMP-4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA Kit,48T/96T 進口/原裝
Dey/Engley 中和肉湯基礎(chǔ) 250g/瓶 用于化妝品樣品的制備和衛(wèi)生環(huán)境 中細的培養(yǎng),每升培養(yǎng)基中需添加1 支 20204現(xiàn)貨促銷
乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒英文名稱:Human hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA Kit,48T/96T 特價促銷
Dey/Engley 中和瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物的培養(yǎng),每升 培養(yǎng)基中需添加 1 支 20204特價供應(yīng)
丁型肝炎IgG(HDV IgG)ELISA試劑盒英文名稱:human Hepatitis D virus IgG,HDV IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠白介素18(IL-18)ELISA Kit,48T/96T 進口/原裝
緩沖蛋白胨水(BPW) 250g/瓶 用于沙門氏、阪崎腸桿前增, 也可用于其它細的培養(yǎng)現(xiàn)貨促銷
游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒英文名稱:Human Free Testoterone,F(xiàn)-TESTO ELISA Kit規(guī)格:96T/48T山羊白介素4(IL-4)ELISA Kit,48T/96T 特價促銷
豆粉瓊脂血液 250g/瓶 每 100ml 培 養(yǎng) 基 中 添 加 5ml~10ml50701,配制成血瓊脂平板,用于細 培養(yǎng)或溶血試驗特價供應(yīng)
白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒英文名稱:Human Leukotriene C4,LT-C4 ELIS