試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
胸腺肽 α1 英文名稱 分子量測定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

百部（對葉百部） 英文名稱 TLC法鑒別  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

野牡丹 英文名稱 TLC法鑒別  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

鹽酸西替利嗪  英文名稱 含量測定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

370 虱螨脲,磷化氫標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號： 0.1g 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量：

右佐匹克隆 英文名稱 HPLC鑒別，UV含量測定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

姜黃素 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： Curcumin

葉下珠 英文名稱 中藥對照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

荷葉堿 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 含量測定

氧化苦參堿 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 含量測定

新橙皮苷 英文名稱 Neohesperidin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%BIBR 1532Telomerase Inhibitor X； 2-[[（2E）-3-（2-naphthalenyl）-1-oxo-2-buten-1-yl]amino]-benzoic acid

5-Chloro-N-[4-（cyclohexylureidosulfonyl）phenethyl]-2-methoxybenzamide； Glyburide， N-p-[2-（5-Chloro-2-methoxybenzamido）ethyl]benzenesulfonyl-N’-cyclohexylureaGlibenclamide

MS-PPOH （1 mg）N-（methylsulfonyl）-2-（2-propynyloxy）-benzenehexanamide； MS-PPOH

2-（2，4-Difluorophenyl）-6-（1-（2，6-difluorophenyl）ureido）nicotinamideVX-702

JWH 210 7-ethylnaphthyl isomer （1 mg）（7-ethyl-1-naphthalenyl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）-methanone； JWH 234； JWH 210 7-ethylnaphthyl isomer

CITCO Positive Control （10 mM） （10 ul）CITCO Positive Control （10 mM）

氫氧化鉀（500GM）Potassium Hydroxide， CAS# 1310-58-3； MW 56.11； HAZARDOUS MATERIAL

5（6）-EET （500 ug）（±）5（6）-epoxy-8Z，11Z，14Z-eicosatrienoic acid； 5（6）-EpETrE； 5（6）-EET

N-[4-[（2-Amino-6-methyl-4-pyrimidinyl）amino]phenyl]-4-（4-quinolinylamino）benzamideSGI-1027

Prostaglandin G2 （50 ug）9。alpha。，11。alpha。-epidioxy-15S-hydropeoxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； PGG2； Prostaglandin G2

Malioxamycin （1 mg）[[[（2S）-2R-amino-3-methyl-1-oxobutyl]amino]oxy]-butanedioic acid

peoxynitrite （10 ml）peoxynitrous acid， sodium salt； Sodium peoxynitrite； peoxynitrite

小鼠腦鈉素(BNP)ELISA試劑盒 Wort 瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 麥芽汁瓊脂基礎(chǔ)，用于真，特別 是酵母的計數(shù)，每 100ml 培養(yǎng)基 中添加 0.235g21702特價供應(yīng)

蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)ELISA試劑盒英文名稱：Human Protein disulfide-isomerase precursor,PDI ELISA Kit規(guī)格:96T/48T基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

 M-綠色酵母和霉肉湯 250g/瓶 用于飲料中酵母和霉的檢測現(xiàn)貨促銷

烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒 英文名稱：Human aconitase 2,ACO-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit，48T/96T 特價促銷

 Littman 瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于真的 分離培養(yǎng) ，每  100ml培養(yǎng)基中添加 0.3g 鏈霉素特價供應(yīng)

血管**素受體/含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒英文名稱：Human tyrosine kinase with immuglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

 沙氏 BHI 瓊脂 250g/瓶 用于真的檢測現(xiàn)貨促銷

心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒 英文名稱：Human cardiac isoform of Tropnin T,c ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA Kit，48T/96T 特價促銷

 BIGGY 瓊脂 250g/瓶 用于念珠的分離和計數(shù)特價供應(yīng)

未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA試劑盒 英文名稱：Human CpG oligodeoxynucleotide,CpG-ODN ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

 曲霉素瓊脂（AFPA） 250g/瓶 用于曲霉和寄生曲霉的分離培 養(yǎng)現(xiàn)貨促銷

上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒 英文名稱：Human epithelial specific antigen,ESA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抵抗素(Resistin)ELISA Kit，48T/96T 特價促銷