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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Ankyrin Repeat Domain Protein 1(ANKRD1)ELISA Kit |
貨號 |
PM105200 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
胺磷 標準品 CAS號:10265-92-6 100mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
3-異倒捻子素 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
異烏藥內(nèi)酯 英文名稱 異烏藥醚內(nèi)酯 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: Isolinderalactone
雞蛋花 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
磷酸喹 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: UV法含量測定
卷柏(卷柏) 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
商陸皂苷甲 英文名稱 Esculentoside A 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
檸檬酸 英文名稱 Citric acid monohydrate 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
甲砜霉素 英文名稱 HPLC法含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
芭蕉根 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
阿魏酸 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) Calpain Inhibitor I (10 mg)N-acetyl-L-leucyl-N-[(1S)-1-formylpentyl]-L-leucinamide; Ac-Leu-Leu-Nle-Aldehyde|ALLN|MG 101; Calpain Inhibitor I
13,14-dihydro-16,16-difluoro Prostaglandin F2α (5 mg)9α,11α,15S-trihydroxy-16,16-difluoro-prosta-5Z-en-1-oic acid; 13,14-dihydro-16,16-difluoro PGF2α; 13,14-dihydro-16,16-difluoro Prostaglandin F2α
MC 1568 (5 mg)(2E)-3-[5-[(1E)-3-(3-fluorophenyl)-3-oxo-1-propen-1-yl]-1-methyl-1H-pyrrol-2-yl]-N-hydroxy-2-propenamide
PtdIns-(3)-P1 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt) (1 mg)1-(1,2-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol-3-phosphate, diammonium salt; DPPI-3-P1; PtdIns-(3)-P1 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt)
FluoroQuest封片劑,含DAPIFluoroQuest Mounting Medium with DAPI
2,3,4,5-Tetrahydro-7-hydroxy-1H-benzofuro[2,3-c]azepin-1-oneCID-755673
KC7F2 (10 mg)N,N’-(dithiodi-2,1-ethanediyl)bis[2,5-dichloro-benzenesulfonamide; KC7F2
DNQX (10 mg)1,4-dihydro-6,7-dinitro-2,3-quinoxalinedione; 6,7-Dinitroquinoxaline-2,3-dione|FG 9041; DNQX
8-iso Prostaglandin E2 isopropyl ester (10 mg)8-iso PGE2 isopropyl ester, 8-iso Prostaglandin E2 isopropyl ester, 9-oxo-11.alpha.,15S-dihydroxy-(8.beta.)-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, isopropyl ester
5-fluoro PB-22 6-hydroxyquinoline isomer (10 mg)quinolin-6-yl 1-(5-fluoropentyl)-1H-indole-3-carboxylate; 5-fluoro PB-22 6-hydroxyquinoline isomer
13-epi-12-oxo Phytodienoic Acid (5 mg)13-epi-12-oxo PDA, 13-epi-12-oxo Phytodienoic Acid, 4-oxo-5R-(2Z)-2-pentenyl-2-cyclopentene-1S-octanoic acid
iFluor 680琥珀酰SEiFluor 680 succinimidyl ester
小鼠錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)ELISA Kit 碎肉肉湯基礎(chǔ) 250g/瓶 用于厭氧特別是專性厭氧的 培養(yǎng)、增和修復(fù),含維生素 K, 需添加 11002(庖肉牛肉粒)特價供應(yīng)
大鼠乙酰膽堿(Ach)ELISA試劑盒英文名稱:Rat acetylcholine,ACH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T孤腓肽(OFQ/N)ELISA Kit,48T/96T
碎肉葡萄糖肉湯基礎(chǔ) 250g/瓶 用于厭氧特別是專性厭氧的 培養(yǎng)、增和修復(fù),含維生素 K, 需添加 11002(庖肉牛肉粒)現(xiàn)貨促銷
大鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Histamine,HIS ELISA Kit規(guī)格:96T/48T豬生長釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA Kit,48T/96T
碎肉碳水化合物肉湯基礎(chǔ) 250g/瓶 用于厭氧特別是專性厭氧的 培養(yǎng)、增和修復(fù),含維生素 K, 需添加 11002(庖肉牛肉粒)特價供應(yīng)
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒英文名稱:Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4,TRAIL R4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T鼻咽癌(NPC)ELISA Kit,48T/96T
普通啤酒瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于啤酒腐敗、厭氧的檢測現(xiàn)貨促銷
大鼠醛固酮(ALD)ELISA試劑盒英文名稱:rat aldosterone,ALD ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA Kit,48T/96T
改良 NBB 瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于啤酒中厭氧的檢測特價供應(yīng)