咨詢電話:18117197628
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠硫氧還蛋白還原酶1(TrxR1)ELISA試劑盒 |
英文名稱 |
Mouse Thioredoxin Reductase 1(TrxR1)ELISA Kit |
貨號 |
PM105206 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
木鱉子 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
玉葉金花 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
白頭翁皂苷B4 英文名稱 白頭翁皂甙B4 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: Anemoside B4
角黃素 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:0.15g 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
地膚子皂苷Ic 英文名稱 Momordin Ic 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥97%
奧美拉 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
異鼠李素-3-O-新橙皮苷 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
甲基丁香酚 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
干皮 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
丹酚酸B 英文名稱 丹參酚酸B 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: Salvianolic acid B
克拉維酸鉀 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:100mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: N-tert-butyl-3-(5-methyl-2-(4-(2-(pyrrolidin-1-yl)ethoxy)phenylamino)pyrimidin-4-ylamino)benzenesulfonamide; SAR302503TG101348
GYY4137GYY4137
Pentostatin (1 mg)(8R)-3-(2-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl)-3,4,7,8-tetrahydro-imidazo[4,5-d][1,3]diazepin-8-ol; CI 825|CL 67310465|DCF|Deoxycoformycin|NSC 218321|NSC 24752Pentostatin
D-熒光素 乙酯D-Luciferin ethyl ester
Stauprimide (5 mg)N-Benzoyl-7-oxo Staurosporine; N-[(9S,10R,11R,13R)-2,3,10,11,12,13-hexahydro-10-methoxy-9-methyl-1,3-dioxo-9,13-epoxy-1H,9H-diindolo[1,2,3-gh:3’,2’,1’-lm]pyrrolo[3,4-j][1,7]benzodiazonin-11-yl]-N-methyl-benzamide
Diphenidine (hydrochloride) (10 mg)1-(1,2-diphenylethyl)pipeidine|DEP; 1-(1,2-diphenylethyl)-pipeidine, monohydrochloride
Cell-Based Assay Myelopeoxidase Inhibitor (50 ul)Cell-Based Assay Myelopeoxidase Inhibitor
n-Dodecyl-β-D-maltoside (1 g)DDM|Dodecyl Maltoside; dodecyl 4-O-α-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranoside
Dihydrocapsaicin (50 mg)N-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-8-methyl-nonanamide; Dihydrocapsaicin
Cell-Based Alkaline Phosphatase Standard (50 uL)Cell-Based Alkaline Phosphatase Standard
5/6-FAM標(biāo)記的Glu谷氨FMOC-Glu(5/6-FAM)-OH
Phosphoramidon (sodium salt) (1 mg)N-[N-[[(6-deoxy-a-L-mannopyranosyl)oxy]hydroxyphosphinyl]-L-leucyl]-L-tryptophan, disodium salt; Phosphoramidon (sodium salt)
小鼠硫氧還蛋白還原酶1(TrxR1)ELISA試劑盒 葡萄糖蛋白胨瓊脂(DT) 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于需氧芽孢桿計(jì)數(shù)特價供應(yīng)
山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒英文名稱:Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA Kit,48T/96T 特價促銷
DTA 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于乳與乳制品中嗜熱需氧芽孢 數(shù)的測定現(xiàn)貨促銷
周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Cyclin-dependent kinase 4,CDK-4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/原裝
NGKG 瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于食品中蠟樣芽胞桿的檢測, 每 200ml 培養(yǎng)基中添加 2 支 21001 和 1 支 21201特價供應(yīng)
基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒英文名稱:Human Matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T馬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA Kit,48T/96T 特價促銷
胰蛋白胨酵母浸粉肉湯ISP Medium 1(Tryptone Yeast Extract Broth) 250g/瓶 用于鏈霉屬的培養(yǎng)鑒定現(xiàn)貨促銷
熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒英文名稱:Human Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/原裝
高氏合成一號瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于放線的培養(yǎng)特價供應(yīng)
非甲基化寡核苷酸(N)ELISA試劑盒 英文名稱:Human nmethylated oligonucleotide,N ELISA Kit規(guī)格:96T/48T血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA Kit,48T/96T特價促銷
酵母膏-麥芽膏瓊脂ISP Medium 2(Yeast Extract Malt Extract Agar) 250g/瓶 用于鏈霉屬的培養(yǎng)鑒定現(xiàn)貨促銷
OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-OJ-antibody,OJ/IleRS ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠抵抗素(Resistin)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/原裝