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試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠顆粒酶M(GZMM)免費代測ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Granzyme M(GZMM)ELISA Kit |
貨號 |
PM105240 |
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
茶堿 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: Theophylline
阿莫西林 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
甘氨酸 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 鑒別
D-半乳糖醛酸 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: UV法含量測定
吳茱萸內(nèi)酯 英文名稱 Evodine 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
穗花杉雙黃酮 英文名稱 Amentoflavone 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 0.97
葛根素 英文名稱 Puerarin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
卷柏(卷柏) 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
乙氧基白屈菜紅堿 英文名稱 鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
甘露醇 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
氟康 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 新型鈣離子熒光探針Quest Fluo-8FF, 鉀鹽Quest Fluo-8FF, potassium salt
Dovitinib (25 mg)4-
1,2-Dimyristoyl-sn-glycerol-3-PC (250 mg)1,2-dimyristoyl-sn-glycerol-3-phosphatidylcholine; 1,2-DMPC|1,2-Dimyristoyl-sn-glycerol-3-Phosphocholine; 1,2-Dimyristoyl-sn-glycerol-3-PC
TF8 馬來酰亞胺 近紅外發(fā)射Tide Fluor 8 maleimide [TF8 maleimide] Near Infrared Emission
(±)9-HODE cholesteryl ester (100 ug)(±)-9-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; (±)9-HODE cholesteryl ester
15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin E1 (500 ug)9-oxo-11。alpha。,15R,19R-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 15(R),19(R)-hydroxy PGE1; 15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin E1
LAQ824 (1 mg)Dacinostat|NVP-LAQ824; (2E)-N-hydroxy-3-[4-[[(2-hydroxyethyl)[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]amino]methyl]phenyl]-2-propenamide
二基化組蛋白H3K9多肽Dimethyl Histone H3K9 Peptide (100 ul)
JWH 398 N-(5-hydroxypentyl) metabolite (10 mg)(4-chloronaphthalen-1-yl)(1-(5-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 398 N-(5-hydroxypentyl) metabolite
Protein A-AgaroseProtein A-Agarose
Palmityl Trifluoromethyl Ketone (10 mg)1,1,1-trifluoro-2-heptadecanone; PTK|Pentadeca Trifluoromethyl Ketone; Palmityl Trifluoromethyl Ketone
(-)-Epigallocatechin gallate(-)-Epigallocatechin gallate
小鼠顆粒酶M(GZMM)免費代測ELISA Kit桔汁瓊脂 特價供應 用于飲料中耐酸細的分離培養(yǎng)(ACUMEDIA方法)
粒細胞集落激因子(G-CSF)ELISA試劑盒英文名稱:Human Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA Kit,48T/96T 進口/國產(chǎn)
CATC瓊脂 現(xiàn)貨促銷 用于食品和飲料腸球的分離培養(yǎng)(MERCK方法)
橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human desmogleins 1,DGS-E1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA Kit,48T/96T 進口/分裝
EEM培養(yǎng)基 特價供應 用于致病性大腸桿的增培養(yǎng)和腸桿的增培養(yǎng)(Japan方法)
肺表面活性物質(zhì)相關蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒英文名稱:Human Pulmonary surfatcant-associated protein B,SP-B ELISA Kit規(guī)格:96T/48T低分子肝素(LMWH)ELISA Kit,48T/96T 進口/國產(chǎn)
胰蛋白胨膽鹽瓊脂 現(xiàn)貨促銷 用于大腸桿的膜過濾法選擇性培養(yǎng)(ISO標準)
抗細胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-lymphocytotoxic antibody,ALA/LCA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA Kit,48T/96T 進口/分裝
膽鹽七葉苷瓊脂 特價供應 250 用于腸球和腸道致病的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
抗IgE受體抗體ELISA試劑盒英文名稱:Human anti-IgE receptor antibody ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗BB抗體(BB-Ab)ELISA Kit,48T/96T 進口/國產(chǎn)
VRBG 瓊脂 現(xiàn)貨促銷 250 用于奶粉中坂崎桿的分離培養(yǎng)(FDA方法)
痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒英文名稱:Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit規(guī)格:96T/48T氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA Kit,48T/96T 進口/分裝