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我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)ELISA試劑盒 |
英文名稱 |
Mouse Peroxisome Proliferator Activated Receptor Alpha(PPARa)ELISA Kit |
貨號 |
PM105374 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
煙色鏈霉 Streptomyces fumosus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
PVDF膜(0.22um)26.5cm × 3.75m,12cm x 20cmgersion
TPY瓊脂培養(yǎng)基/TPY Medium用于雙岐桿的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
挪威假絲酵母 Candida norvegensis地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis
A2(腺樣囊性細胞)5×106cells/瓶×2
苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
臍靜脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL
銅綠假單胞 Pseudomonas aeruginosaU251(膠質(zhì)瘤細胞)
小鼠成纖維細胞英文名稱:L929
絲氨酸蛋白酶1(PRSS1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protease, Serine 1 (PRSS1)
百脈根根瘤 Rhizobium lotiMDA-MB-231(ATCC來源), 腺細胞(-)-Cotinine (250 mg)NIH 10498; 1-methyl-5S-(3-pyridinyl)-2-pyrrolidinone
Clomiphene (citrate) (5 g)Clomifene|NSC 35770|Omifin; 2-[4-(2-chloro-1,2-diphenylethenyl)phenoxy]-N,N-diethyl-ethanamine 2-hydroxy-1,2,3-propanetricarboxylate (1:1)
StrandBrite 綠色RNA定量試劑 200X DMSO 溶液StrandBrite Green RNA Quantifying Reagent 200X DMSO Solution
NChloroquine Diphosphate
Traumatic Acid (500 mg)2E-dodecenedioic acid; trans-2-Dodecenedioic Acid; Traumatic Acid
1X Red Blood Cell Lysis Buffer1X Red Blood Cell Lysis Buffer
N1-Pyroxamide
Stearoyl Serotonin (10 mg)N-[2-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)ethyl]-octadecanamide; Stearoyl Serotonin
Amitriptyline (hydrochloride) (10 mg)Domical|Elavil|Endep|Saroten; 3-(10,11-dihydro-5H-dibenzo[a,d]cyclohepten-5-ylidene)-N,N-dimethyl-1-propanamine, monohydrochloride
C6 ceramideC6 ceramide
α-PVT (hydrochloride) (5 mg)2-(pyrrolidin-1-yl)-1-(thiophen-2-yl)pentan-1-one, monohydrochloride; CDC|α-Pyrrolidinopentiothiophenone; α-PVT (hydrochloride)
Resveratrol 3-O-D-Glucuronide (2。5 mg)3-hydroxy-5-[(1E)-2-(4-hydroxyphenyl)ethenyl]phenyl-β-D-Glucopyranosiduronic acid; Resveratrol 3-O-D-Glucuronide
小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)ELISA試劑盒 原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制無血清添加劑 規(guī)格: 1ml
小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit規(guī)格:96T/48T豬睪酮(T)ELISA Kit,48T/96T
原代單核細胞特制無血清添加劑 規(guī)格: 1ml
小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit規(guī)格:96T/48T骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA Kit,48T/96T
原代軟骨細胞特制無血清添加劑 規(guī)格: 1ml
小鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA Kit,48T/96T
褐球固氮 Azotobacter chrooccum植物桿 Lactobacillus plantarum
大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Neuroglobin,NGB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA Kit,48T/96T
BGC823(胃細胞)殺結(jié)核鏈霉 Streptomyces tubercidicus
大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Citrate synthase,CS ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit,48T/96T
薛瓦酵母 Saccharomyces chevalieri大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)
大鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒英文名稱:Rat activated protein C,APC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA Kit,48T/96T
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。