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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)免費代測ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Bone Morphogenetic Protein Receptor 1A(BMPR1A)ELISA Kit |
貨號 |
PM105396 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結果準確,每次檢測均需做標準曲線。
轉移胰腺腺細胞英文名稱:AsPC-1
熱帶假絲酵母 Candida tropicalisFaDu(咽鱗細胞)
SOB瓊脂/SOB AgarBR250克國產(chǎn)/進口
鈣結合蛋白(CR)重組蛋白英文名稱:Recombinant Calretinin (CR)
SW1116(結腸腺細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
表皮黑色素細胞完全培養(yǎng)基100mL
大隱靜脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基肺細胞(結轉移)
肝細胞英文名稱:Huh-7
NCI-N87 [N87]胃細胞
SK-Hep-1(肝細胞)5×106cells/瓶×2
細蛋白胨/Bacto PeptoneBR250克國產(chǎn)/進口L-DOPA methyl ester (hydrochloride) (500 mg)L-3,4-Dihydroxyphenylalanine|LDME|Levodopa methyl ester|ST 41769; 3-hydroxy-L-tyrosine, methyl ester, monohydrochloride
AM80 (25 mg)Amnolake|NSC 608000|Retinobenzoic Acid|Tamibarotene; 4-
L-NIL (hydrochloride) (100 mg)N6-(1-iminoethyl)-L-lysine, dihydrochloride; L-NIL (hydrochloride)
3β,14-Dihydroxy-5β,20(22)-bufadienolide, 5β,20(22)-Bufadienolide-3β,14-diolBufalin
AAF-CMK (trifluoroacetate salt) (5 mg)L-alanyl-N-[(1S)-3-chloro-2-oxo-1-(phenylmethyl)propyl]-L-alaninamide, mono(trifluoroacetate); N-Ala-Ala-Phe-CMK|Tripeptidyl Peptidase Inhibitor II; AAF-CMK (trifluoroacetate salt)
JWH 018 benzimidazole analog (5 mg)naphthalen-1-yl(1-pentyl-1H-benzo[d]imidazol-2-yl)methanone; JWH 018 benzimidazole analog
1-hydroxy Vitamin D3 (1 mg)5-[2E-[(3aS)-1R-[1R,5-dimethylhexyl]octahydro-7aR-methyl-4H-inden-4-ylidene]ethylidene]-4-methylene-1R,3R-cyclohexanediol; 1-Hydroxycholecalciferol|Alfacalcidol|Bondiol|Etalpha|Oxydevit|Tevabone; 1-hydroxy Vitamin D3
Metoprolol (succinate) (25 mg)1-[4-(2-methoxyethyl)phenoxy]-3-[(1-methylethyl)amino]-2-propanol, butanedioic acid
Oleandomycin4-Methylumbelliferyl α-D-galactoside; 7-(α-D-galactopyranosyloxy)-4-methyl-2H-1-benzopyran-2-one
13(R)-HODE cholesteryl ester (100 ug)13R-hydroxy-9Z,11E-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 13(R)-HODE cholesteryl ester
Carprofen (500 mg)Carprodyl|NSC 297935; 6-chloro-α-methyl-9H-carbazole-2-acetic acid
13(S)-HODE-d4 (50 ug)13S-hydroxy-9Z,11E-octadecadienoic-9,10,12,13-d4 acid; 13(S)-HODE-d4
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)免費代測ELISA Kit植物桿 Lactobacillus plantarum光帽鱗傘 Pholiota nameko
大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒英文名稱:Rat dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)ELISA Kit,48T/96T
費氏中華根瘤 Sirhizobium fredii血管內(nèi)皮細胞
大鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒英文名稱:Rat anti-IgE receptor antibody ELISA Kit規(guī)格:96T/48T魚類主要組織相容性復合體(MHC)ELISA Kit,48T/96T
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞HUVEC, 臍靜脈內(nèi)皮細胞
大鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T可溶性CD146分子(sCD146)ELISA Kit,48T/96T
少根根霉 Rhizopus arrhizus異常漢遜酵母 Hansenula amala
大鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Immuglobulin A,IgA ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA Kit,48T/96T
香栓 Trametes suaveloens大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum
大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒英文名稱:Rat L-Selectin ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T2,3Dir血栓烷B2(2,3-dir-TXB2)ELISA Kit,48T/96T
小鼠成纖維細胞完全培養(yǎng)基CNE(鼻咽細胞)
大鼠生長(GH)ELISA試劑盒英文名稱:Rat growth hormone,GH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T花生四烯酸(AA)ELISA Kit,48T/96T