試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
香菇 Lentinula edodesMDA-MB-468-06(腺細胞)

MFC培養(yǎng)基/MFC Medium飲用水中大腸群濾膜法檢驗250克國產(chǎn)/進口

無花果曲霉 Aspergillus ficuum

大鼠大隱靜脈內(nèi)細胞完全培養(yǎng)基100mL

O157顯色培養(yǎng)基/大腸桿O157顯色培養(yǎng)基/O157 Chromogenic Medium用于大腸桿O157的顯色培養(yǎng)1升國產(chǎn)/進口

大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicumBurkitt`s瘤細胞

MFC-GFP(小鼠前胃細胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae無花果曲霉 Aspergillus ficuum

SDS-PAGE Loading Buffer (還原，5x)10ml國產(chǎn)

His標(biāo)簽蛋白裂解液20 ug

MSTO-211H(肺細胞)5×106cells/瓶×2Δ17-6-keto Prostaglandin F1α （1 mg）6-oxo-9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-prosta-13E，17Z-dien-1-oic acid； ω-3 6-keto PGF2α； Δ17-6-keto Prostaglandin F1α

MK-733； SynvinolinSimvastatin

Meconin-d3 （10 mg）6，7-dimethoxy-1（3H）-isobenzofuranone-d3； NSC 35547-d3|Opianyl-d3； Meconin-d3

Mammalian Protein Extraction ReagentEZLys Mammalian Protein Extraction Reagent

超濾酵母提取物（100GM）Yeast Extract， Ultra Filtered， CAS# 8013-01-2

Prostaglandin F2α 1，15-lactone （5 mg）9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid， 1，15-lactone； PGF2α 1，15-lactone； Prostaglandin F2α 1，15-lactone

（+）-trans-C75 （10 mg）tetrahydro-4-methylene-2S-octyl-5-oxo-3R-furancarboxylic acid； （2R，3S）-C75； （+）-trans-C75

15（S）-HETE-biotin （100 ug）15S-hydroxy-5Z，8Z，11Z，13E-eicosatetraene-（2-biotinyl）hydrazide； 15（S）-HETE-biotin

Rifaximin （500 mg）L 105SV|Rifamycin L 105|Xifaxan； （2S,18E,28E）-25S-（acetyloxy）-5,6,21S,23R-tetrahydroxy-27S-methoxy-2,4,11,16Z,20S,22R,24R,26R-octamethyl-2,7-（epoxypentadeca[1,11,13]trienimino）benzofuro[4,5-e]pyrido[1,2-a]benzimidazole-1,15（2H）-dione

Gossypol （100 mg）1，1’，6，6’，7，7’-hexahydroxy-3，3’-dimethyl-5，5’-bis（1-methylethyl）-[2，2’-binaphthalene]-8，8’-dicarboxaldehyde； BL 193|NSC 56817|NSC 624336|Pogosin； Gossypol

Meropenem （25 mg）ICI 194660|Merrem I.V.|SM 7338； （4R,

Arachidonoyl Glycine （5 mg）N-[1-oxo-5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenyl]-glycine； NAGly|N-Arachidonyl Glycine； Arachidonoyl Glycine

小鼠干擾素γ(IFNγ)免費代測ELISA Kit紫紅曲霉 Monascus purpureus腎近曲小管上皮細胞

大鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Estradiol,E2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T鯉魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA Kit，48T/96T

骨髓間充質(zhì)干細胞（hMSCs）A-375 [A375], 惡性黑素瘤細胞株

大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T可溶性細胞因子受體(sCKR)ELISA Kit，48T/96T

HEC-1A, 內(nèi)膜細胞系異常漢遜酵母 Hansenula amala

豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1(GSLT1)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine sodium-glucose cotransporter 1,GSLT1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T他克莫司(FK506)ELISA Kit，48T/96T

鼠李糖桿 Lactobacillus rhamsus香菇 Lentinula edodes

豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒英文名稱：swine major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T血小板生長因子(PGF)ELISA Kit，48T/96T

蘇云金芽孢桿 Bacillus thuringiensisCalu-1(肺細胞)

豬表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine Epithelial growth factor,EGF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA Kit，48T/96T

TE-11(食管細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒英文名稱：Chicken Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)ELISA Kit，48T/96T