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ELISA檢測概述
ELISA酶聯(lián)試劑盒是以學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實驗技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
產(chǎn)品名稱:小鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒步驟
英文名稱:Mouse Procollagen I N-Terminal Propeptide(PINP)ELISA Kit
貨號:PM105861
規(guī)格:96T/48T
保存;2-8℃。
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100μL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn),已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應的生產(chǎn)批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
綠膿素測定用培養(yǎng)基/PDP瓊脂/King Medium A綠膿色素測定250克國產(chǎn)/進口
大鼠心肌細胞完全培養(yǎng)基MDA-MB-415(腺細胞)
A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF)
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞
Rustigian氏尿素培養(yǎng)液/ Rustigian氏尿素肉湯/Rustigian Urea Broth細尿素酶試驗100克國產(chǎn)/進口
丹參酮IIAU-2 OS, 骨肉瘤細胞
基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15)
淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus弗吉尼亞鏈霉 Streptomyces virginiae
7.5% NaHCO3溶液規(guī)格:100ml
HE瓊脂/Hektoen瓊脂培養(yǎng)基/腸道病培養(yǎng)用瓊脂/Hektoen Enteric Agar用于沙門氏屬和志賀屬的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
小鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒步驟2 ug pHY43 pHY43 低溫運輸,-20℃保存人 S100A8 基因全長ORF克隆
2 ug pIC111 pIC111 低溫運輸,-20℃保存人 S100A16 基因全長ORF克隆
2 ug pIEXBac-1 pIEXBac-1 低溫運輸,-20℃保存人 S100A3 基因全長ORF克隆
2 ug pIE1-neo pIE1-neo 低溫運輸,-20℃保存人 LGALS12 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆
2 ug pIEXBac-c-EGFP-1 pIEXBac-c-EGFP-1 低溫運輸,-20℃保存人 FGF13 基因全長ORF克隆
2 ug pIEXBac-c-EGFP-2 pIEXBac-c-EGFP-2 低溫運輸,-20℃保存人 PTAFR 基因全長ORF克隆
2 ug pIEXBac-c-EGFP-3 pIEXBac-c-EGFP-3 低溫運輸,-20℃保存人 AGPAT6 基因全長ORF克隆
2 ug pIEXBac-c-EGFP-4 pIEXBac-c-EGFP-4 低溫運輸,-20℃保存人 UBE3A 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆
2 ug PiggyBac 3’LTR PiggyBac 3’LTR 低溫運輸,-20℃保存人源CES3 基因cDNA克隆
2 ug PiggyBac 5’LTR PiggyBac 5’LTR 低溫運輸,-20℃保存人 GALNT14 基因全長ORF克隆
公司產(chǎn)品優(yōu)勢:
1,全:公司提供上萬種產(chǎn)品,涵蓋了生物試劑,elisa試劑盒,標準品,培養(yǎng)基,原裝耗材等,基本上各種科研所需產(chǎn)品在我司都能找到。
2,新:產(chǎn)品更新速度較快,基本上每周都有新產(chǎn)品出現(xiàn)。
3,優(yōu):產(chǎn)品質(zhì)量好,零投訴。
4,品牌多:公司代理的試劑品牌:Amresco、Sigma、Fluka、Alfa、TCI、Merck等進口品牌,國產(chǎn)品牌我們價格更優(yōu),我們供應優(yōu)級純,分析純,化學純,試劑級,基準試劑,實驗純,教學試劑,高純試劑,色譜純,光譜純,電子純等試劑級別(可根據(jù)客戶需求定制)。
5,售后:我公司具有上等的技術(shù)團隊,產(chǎn)品一旦售出,產(chǎn)品僅用于科研實驗過程中遇到困難可提供在線技術(shù)咨詢。使您使用產(chǎn)品時沒有任何的后顧之憂。