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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:DLD-1 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號(hào):P-X8925
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
DLD-1 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:SNU-1581乳腺癌細(xì)胞 Fas相互作用蛋白激酶2抗體 Cellular(RBP1)ELISA Kit 視黃醇結(jié)合蛋白定量elisa kit CTAGE6蛋白抗體 SK-N-AS神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
詳情介紹:

DLD-1 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞


英文簡(jiǎn)稱

規(guī)格

貨號(hào)

DLD 1

1×106

P-X8925

產(chǎn)品詳情:


細(xì)胞別稱;DLD 1; DLD1; CoCL3;人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

種屬來(lái)源;人

年齡性別;成年

組織來(lái)源;結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞

生長(zhǎng)特性;貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣

背景簡(jiǎn)介;DLD-1細(xì)胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分離的兩株結(jié)直腸腺癌細(xì)胞株中的一株。在ATCC和其它地方進(jìn)行的DNA指紋鑒定和染色體組型分析表明DLD-1細(xì)胞與HCT-15細(xì)胞相似,說(shuō)明這兩者是來(lái)自同一個(gè)人的不同克隆。DLD-1細(xì)胞和HCT-15細(xì)胞的遺傳起源可通過(guò)DNA指紋鑒定證實(shí),但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標(biāo)記一致改變或數(shù)目上一致改變。DLD-1細(xì)胞的CSAp陰性(CSAp-),p53抗原表達(dá)呈陽(yáng)性(p53抗原產(chǎn)生了一個(gè)C→T點(diǎn)突變導(dǎo)致241位的Ser→Phe)。DLD-1細(xì)胞角蛋白過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性,癌基因c-myc、K-rasH-ras、N-ras、mybsisfos的表達(dá)呈陽(yáng)性,癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測(cè)。DLD-1細(xì)胞表達(dá)腫瘤特異性核基質(zhì)蛋白CC-2CC-3、CC-4、CC-5CC-6。1979年提交到ATCCDLD-1細(xì)胞代數(shù)不明且污染了支原體,其后經(jīng)過(guò)12周多種聯(lián)合培養(yǎng)處理,處理之后每周用Hoechst染色和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)法檢測(cè)。其后連續(xù)11個(gè)月不加培養(yǎng),DLD-1細(xì)胞所有的檢測(cè)呈陰性。

STR位點(diǎn);AmelogeninX,YCSF1PO11,12;D12S39119,22;D13S3178,11;D16S53912,13D18S5111,17;D19S43314,16;D21S1129,32.2;D2S133817,25;D3S135817,17;D5S81813,13D6S104311,13;D7S82010,12D8S117915,15;FGA22,22Penta E7,14;TH017,9.3;TPOX8,11vWA18,19;

細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)

生物等級(jí);1

細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T251mL凍存管

支原體檢測(cè);無(wú)

保藏機(jī)構(gòu);ATCC; CCL-221 BCRC; 60132 DSMZ; ACC-278 ECACC; 90102540

培養(yǎng)基;RPMI-1640+10%FBS+1%PS

培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件;無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細(xì)胞處理:

1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜

。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例:
1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過(guò)夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實(shí)驗(yàn)原理:


實(shí)驗(yàn)步驟:


1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上,利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞,并置于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基,并繼續(xù)培養(yǎng);
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開(kāi)始加藥篩選培養(yǎng),直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%,獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。

公司正在出售的產(chǎn)品:

猴環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)elisa生化檢測(cè)試劑盒

植物吲哚乙酸(IAA)elisa分析檢測(cè)試劑盒

cGMP ELISA Kit

人β乳糖蛋白抗體IgG elisa分析檢測(cè)試劑盒

人法尼醇X受體(FXR)elisa生化檢測(cè)試劑盒

Oil red O or Sudan black

FXRELISAKit

大鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGFelisa檢測(cè)試劑盒

飛燕草素-O-葡萄糖苷含量測(cè)試盒

小鼠接觸蛋白1(CNTN1)elisa檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞熒光素酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒

碳酸酐酶2抗體 CA II

小鼠吡啶交聯(lián)物(PY)elisa檢測(cè)試劑盒

源盒蛋白GSC抗體 GSC

大鼠Ⅲ型前膠原氨基端原肽(PNP)elisa檢測(cè)試劑盒

RALGPS1蛋白抗體 RALGPS1

甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白14抗體 METTL14

Rho鳥(niǎo)苷酸交換因子2重組兔單克隆抗體 GEF H1

煙堿型乙酰膽堿受體α3抗體 CHRNA3

2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框88抗體 C2orf88

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2抗體 IGFBP2

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框165抗體 C6orf165

電壓門控性鉀通道蛋白亞基KV6.3抗體 KCNG3

基質(zhì)金屬蛋白酶20

多聚腺苷酸因子Clp1蛋白抗體 HEAB

FXYD離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子6抗體 FXYD6

FITC標(biāo)記小鼠CD107a單克隆抗體 mouse CD107a/FITC

DLD-1 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞氯離子通道蛋白27抗體 CLIC1

內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE2抗體 SCUBE2

細(xì)胞TUBULIN蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

黃體**素(LH)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

小鼠白蛋白elisa分析檢測(cè)試劑盒


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