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細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。
英文簡稱
規(guī)格
貨號
SW1116:SW1116
1×106
P-X976
產(chǎn)品詳情：
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
生長培養(yǎng)基 Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，100%
溫度：37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
注意事項 1、該細(xì)胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳，會產(chǎn)生細(xì)胞毒性； 2、如您沒有無二氧化碳的培養(yǎng)箱，可使用DMEM替代Leibovitz's L-15，使用DMEM培養(yǎng)基時即可正常通入5%二氧化碳； 3、配套專用培養(yǎng)基默認(rèn)Leibovitz's L-15配置，如需DMEM配方，請聯(lián)系銷售下單備注更改。
背景描述 SW1116細(xì)胞CSAp陰性(CSAp-)、結(jié)腸抗原3陰性；SW1116細(xì)胞角蛋白過氧化物酶染色陽性。癌基因檢測表明，SW1116細(xì)胞c-myc、K-ras、H-ras、myb、sis和fos的表達(dá)呈陽性，未檢測到癌基因N-myc和N-ras的表達(dá)。SW1116還表達(dá)腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白CC-4、CC-5和CC-6。
年齡（性別） 男性，73歲
組織來源 結(jié)腸腺癌Ⅲ期
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 腸癌細(xì)胞
生物等級 1
倍增時間 ~96-144小時
致瘤性 Yes, in nude mice.
抗原表達(dá)情況 Blood Type O, Rh+
基因表達(dá)情況 carcinoembryonic antigen (CEA) 2654 ng/10^6 cells/10 days; keratin
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CCL-233 ECACC; 87071006
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細(xì)胞處理：
1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜
。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗使用。下面T25瓶為例：
1、細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
實(shí)驗原理：
公司正在出售的產(chǎn)品：
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植物玉米素核苷(ZR)elisa分析檢測試劑盒 |
小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)elisa分析檢測試劑盒 |
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ZR ELISA Kit |
轉(zhuǎn)基因棉花GK19品系基因檢測試劑盒 |
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人脆性組氨酸三聯(lián)體(FHIT)elisa分析檢測試劑盒 |
HumanIL-2sRβELISAKit |
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HumanFHITELISAKit |
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)elisa分析檢測試劑盒 |
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小鼠SCAF11蛋白(SFRS2IP/CASP11)elisa檢測試劑盒 |
POMC ELISA kit |
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大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)elisa檢測試劑盒 |
Oncomodulin |
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石蠟切片組織HISTONE H3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 |
人巨細(xì)胞病毒UL49蛋白抗體 |
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癌調(diào)蛋白/癌鈣蛋白抗體 |
HCMV UL49 |
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PE標(biāo)記的小鼠抗牛IgG H&L |
胸腺肽α1抗體 Anti-Thymosin Alpha-1/PTMA |
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Mouse Anti-Bovine IgG H&L / PE |
腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 Anti-PEPT2/SLC15A2 |
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FBX47蛋白抗體 |
鞘脂激活蛋白原抗體 Anti-PSAP |
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FBX47 |
T細(xì)胞識別的鱗狀細(xì)胞抗原抗體 Anti-SART1 |
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人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠硫脂(SULF)抗體elisa分析檢測試劑盒 |
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C/EBPεELISAKit |
SW1116人結(jié)腸腺癌細(xì)胞Mousesulfatide(SULF)antibodyELISAkit |
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大鼠Rho相關(guān)GTP結(jié)合蛋白RhoE elisa分析檢測試劑盒 |
人胱硫醚β-合酶(CBS)elisa分析檢測試劑盒 |
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Rat Rho-related GTP Binding Protein RhoE ELISA Kit |
CBSELISAKit |
實(shí)驗步驟：
1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板，轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。