咨詢電話：18117197628
細胞接收后的處理：
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。
英文簡稱
規(guī)格
貨號
MDA-MB-361:MDAMB361
1×106
P-X842
產(chǎn)品詳情：
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
生長培養(yǎng)基 Leibovitz's L-15＋20% FBS＋1% P/S
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，100%
溫度：37℃
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
注意事項 1、該細胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳，會產(chǎn)生細胞毒性； 2、如您沒有無二氧化碳的培養(yǎng)箱，可使用DMEM替代Leibovitz's L-15，使用DMEM培養(yǎng)基時即可正常通入5%二氧化碳； 3、配套專用培養(yǎng)基默認(rèn)Leibovitz's L-15配置，如需DMEM配方，請聯(lián)系銷售下單備注更改。
年齡（性別） 40歲
組織來源 乳腺腺癌；源自轉(zhuǎn)移部位：腦
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 乳腺癌細胞
保藏機構(gòu) ATCC; HTB-27 ECACC; 92020423
干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細胞處理：
1）凍存細胞的復(fù)蘇：：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜
。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例：
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
實驗原理：
公司正在出售的產(chǎn)品：
|
猴白介素1a(IL1A)elisa分析檢測試劑盒 |
原鈣粘蛋白γA4抗體 |
|
IL1A ELISA kit |
磷酸化酪氨酸激酶A抗體 Anti-Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) |
|
人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)elisa分析檢測試劑盒 |
HIVEP2 |
|
MRPELISAKit |
艾滋病病毒EP2抗體 |
|
P2Y1受體抗體/嘌呤受體抗體 Anti-P2Y1R/P2ry1 |
PCDHGA4 |
|
苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 Anti-PNMT |
Rabbit Anti-Dog IgG H&L / PE-Cy3 |
|
突觸相關(guān)蛋白97抗體 Anti-SAP97 |
磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體 |
|
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗狗IgG H&L |
phospho-ATG9A (Ser735) |
|
大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)elisa分析檢測試劑盒 |
乳腺癌相關(guān)基因2抗體（鋅指蛋白364） Anti-ZNF364/BCA2/RNF115 |
|
Bid ELISA Kit |
螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體 Anti-NHLH2 |
|
人肝素輔因子II-凝血酶(HCII-T)復(fù)合物elisa分析檢測試劑盒 |
染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體 Anti-RCC1 |
|
HumanheparincofactorII-thrombin(HCII-T)complexELISAkit |
線粒體二羧酸載體蛋白抗體 Anti-SLC25A10 |
|
大鼠抗/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)elisa檢測試劑盒 |
人非小細胞肺癌相關(guān)抗原211(CA211)elisa分析檢測試劑盒 |
|
魚類白介素1α(IL-1α)elisa檢測試劑盒 |
MDA-MB-361人乳腺癌細胞大量/酵母細胞基因組DNA純化試劑盒 |
|
胞外基質(zhì)蛋白3抗體 |
無胸腺癥關(guān)鍵蛋白6樣抗體（迪格奧爾格綜合征） |
|
Matrilin 3 |
DGCR6L |
實驗步驟：
1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細胞進行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進行細胞鋪板，轉(zhuǎn)染時細胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系。