CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞

英文名稱	CFPAC-1:CFPAC1	產(chǎn)品形態(tài)	上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞
貨號	P-X688	產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系
規(guī)格	1×106	包裝	株
來源	胰腺管腺癌，肝轉(zhuǎn)移	用途	僅供科研研究使用

細(xì)胞特性：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

生長培養(yǎng)基 IMDM＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 CFPAC-1細(xì)胞是胰腺管腺癌細(xì)胞系，建自26歲白人男性囊性纖維變性(CF)的肝轉(zhuǎn)移灶。CFPAC-1細(xì)胞表達(dá)囊性纖維變性跨膜調(diào)節(jié)因子(CFTR)，CFPAC-1細(xì)胞形態(tài)為上皮細(xì)胞樣且頂端微絨毛極化。CFPAC-1細(xì)胞表達(dá)胰腺管細(xì)胞特征性的細(xì)胞角蛋白和癌胚抗原，倍增時間為30-32小時。CFPAC-1細(xì)胞是亞3倍體的細(xì)胞系，36％的細(xì)胞的染色體模式數(shù)為75。CFPAC-1細(xì)胞傳代至24代時，可在抑制小鼠中致瘤。

年齡（性別） 男；26歲

組織來源 胰腺管腺癌，肝轉(zhuǎn)移

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 胰腺癌細(xì)胞

生物等級 1

倍增時間 ~30-45 hours

致瘤性 Yes, in nude mice (passage 34)

抗原表達(dá)情況 CA19-9 antigen, 12000 units/mL, epithelial keratins

基因表達(dá)情況 carcinoembryonic antigen (CEA), 9ng/mL; pancreatic oncofetal antigen (POA), 28ng/mL; adenocarcinoma associated antigen (ACAA), 5000ng/mL; CA 19-9 antigen, 12000 units/mL; epithelial keratins

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1918 ECACC; 91112501

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。                      
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備MEM（推薦iCell-0012）培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1 mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 4 mL 培養(yǎng)基混 合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min，棄去上清液，加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜 (或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6 cm 皿中，加入約 4 mL 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜) 。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，棄去 消化液，將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 -3min (視細(xì)胞消化情況而定) ，然后在顯微鏡下 觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞，裝入無菌離心管中，1000 rpm 條件下離心 4 min，棄去上清液， 用 PBS 清洗一遍，棄盡 PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度 5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍 存管凍存 1mL 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h 后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng):

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。 
9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

異戊烯基焦磷酸異構(gòu)酶2抗體 IDI2	丙酮酸激酶-M2抗體 PKM2
原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 YAP1	磷酸化肝細(xì)胞核因子4α抗體 phospho-HNF4 (Ser304)
泛素化組蛋白H2B (Lys120)重組鼠單克隆抗體 Ubiquityl-Histone H2B (Lys120)	鋅指蛋白155抗體 ZNF155
肺癌相關(guān)蛋白Y抗體 HOPX/LAGY	腺苷酸激酶抗體 ADK
磷酸化鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 phospho-NHE3 (Ser552)	腸道病毒71型/手足口病病毒3D抗體 EV71 polyprotein 3D
CDK5和ABL1酶底物1抗體 CABLES1	黑素皮質(zhì)素2受體輔助蛋白2抗體 MRAP2
DENND5A蛋白抗體 DENND5A	轉(zhuǎn)化相關(guān)基因MED10抗體 MED10
核糖激酶RBKS抗體 RBKS	轉(zhuǎn)錄因子源蛋白NKX2.4抗體 Nkx2.4
大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa檢測試劑盒	神經(jīng)特異性蛋白抗體 RTN1
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)elisa檢測試劑盒	神經(jīng)元特異性蛋白家族成員2抗體 NSG2
牛肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-II(CPT-II)elisa分析檢測試劑盒	Naked1蛋白抗體 Naked1
體液過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性比色法定量檢測試劑盒	Pacific Blue標(biāo)記人CD16單克隆抗體 human CD16/Pacific Blue
土壤多酚氧化酶（PPO）測試盒	體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶CYP2B2（PROD）活性
大鼠細(xì)胞核因子κB受體活化因子配基（RANKL）elisa檢測試劑盒	CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞小鼠5羥色胺受體2A(5-HTR 2A)elisa分析檢測試劑盒
人腸道病毒71型(EV71)抗體(IgM)elisa分析檢測試劑盒	小鼠維生素A(VA)elisa檢測試劑盒
植物甲羥戊酸激酶（mevalonate kinase）活性比色法	大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa檢測試劑盒