需自備的儀器和用品：

高效液相色譜儀、示差折光檢測(cè)器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器（水系，50個(gè)，0.22μm）、濾膜（水系1個(gè)，0.45μm）、

鈣柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個(gè)，2mL）、超純水。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：操作時(shí)間短，48-50T，可測(cè)40例樣本左右，96-100T,可測(cè)80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測(cè)，部分試劑盒取樣多少請(qǐng)；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗(yàn)： X =99%；

6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)；

7、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測(cè)植物。

測(cè)定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

雙料月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（LST）  250g　PRTFDC1 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μg

**液中和肉湯 Disinfectant Neutralization Broth 250g　CALCA / CGRP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

卵磷脂吐溫稀釋液 Lecithin polysorbate(LP)diluent 250g　Actopaxin 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

A-1培養(yǎng)基 A-1 Medium 250g　Actopaxin 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μg

M-Endo肉湯 M-Endo Broth 250g　Tubulin folding cofactor A 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

CCFA瓊脂基礎(chǔ) CCFA Agar Base 250g　Actopaxin 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB   IP   50 μg

雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 Double Lactose Bile Medium 250g　CFHR2 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 μg

腸道增肉湯 Mossel-Enterobacteriaceae Enrichment Broth 250g　ING5 抗體, 兔單抗 ELISA   WB   IP   50 μg

MSA培養(yǎng)基 MSA Medium 250g　ING5 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB    50 μg

瓊脂培養(yǎng)基F(紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂) Agar Medium F(Violet Red Bile Glucose Agar) 250g　ING5 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μg

腸道富集肉湯培養(yǎng)基（USP） Enterobacteria Enrichment Broth-Mossel 250g　ABHD14B 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   IHC-P    50 μg

革蘭氏陰性增液 Gram Negative Bacteria Enrichment Broth 250g　ABHD14B 抗體, 兔單抗 WB   IP    50 μg

大腸桿噬體MS2液體培養(yǎng)基 Coliphage MS2 Liquid Medium 250g　BLOC1S2 / BLOS2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

糜蛋白酶測(cè)試盒Layilin  透明質(zhì)酸受體抗體規(guī)格: 0.1ml

LAIR-2/CD306  白  相關(guān)球蛋白樣受體2抗體規(guī)格: 0.1ml

LC3B/MAP LC3β/MAP1A  自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體規(guī)格: 0.1ml

LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta  自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體規(guī)格: 0.1ml

LASS1  長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS1抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-MAP1LC3A(Ser12)  磷酸化自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體規(guī)格: 0.1ml

LASS2  腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體規(guī)格: 0.2ml

LASS3  長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS3抗體規(guī)格: 0.2ml

LASS4  長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS4抗體規(guī)格: 0.2ml

LASS5  長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS5抗體規(guī)格: 0.2ml

LASS6  長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS6抗體規(guī)格: 0.2ml

LCAT  卵磷酯膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶抗體規(guī)格: 0.2ml

LATS1  腫瘤抑制基因LATS1抗體規(guī)格: 0.2ml

注意事項(xiàng)：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。