需自備的儀器和用品：

高效液相色譜儀、示差折光檢測(cè)器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過(guò)濾器（水系，50個(gè)，0.22μm）、濾膜（水系1個(gè)，0.45μm）、

鈣柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個(gè)，2mL）、超純水。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：操作時(shí)間短，48-50T，可測(cè)40例樣本左右，96-100T,可測(cè)80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測(cè)，部分試劑盒取樣多少請(qǐng)；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗(yàn)： X =99%；

6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)；

7、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測(cè)植物。

測(cè)定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

豬D聚體(D2D)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  HET-1A, 食管上皮細(xì)胞 Human

大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  GC-1, 鼠精原細(xì)胞 Mouse

牛孕**/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  hDPSCs, 前磨牙牙髓干細(xì)胞 Human

人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 Rattus

人尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  HL-02 [L-02,HL-7702], 正常肝上皮細(xì)胞 Human

人重組激活基因2(RAG-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  HUM, 正常主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  LX-2, 肝星形細(xì)胞株 Human

豬狂犬病毒抗體（RV-ab）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 Mouse

大鼠腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  MCF-7（MCF7）（ATCC來(lái)源）, 乳腺癌細(xì)胞 Human

人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  Caco-2，結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 Human

人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  Saos-2，成骨肉瘤細(xì)胞 Human

核酸助沉劑動(dòng)物組織氧化應(yīng)激活性氧（ROS）魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

植物氧化應(yīng)激活性氧（ROS）魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

血液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

體液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

動(dòng)物  氧化應(yīng)激活性氧（ROS）光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎)5×106cells/瓶×2

人糖皮質(zhì)**（Glucocorticoid）ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維

兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  CRFK(貓腎)5×106cells/瓶×2

小鼠鼠痘病毒抗體（MPV-Ab）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  CRT(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)5×106cells/瓶×2

大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  CSC, 小鼠心肌

大鼠中性粒趨化因子1（CINC-1）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  CSC, 小鼠心肌

人γ氨基丁酸(GABA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  CT26.WT(小鼠結(jié)腸癌)5×106cells/瓶×2

人抗肝微粒體抗體(LKM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  CTLL-2(小鼠T)5×106cells/瓶×2

人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  CW-2(結(jié)腸癌)5×106cells/瓶×2

小鼠周期素D1(Cyclin-D1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  DAB Kit/DAB顯色試劑盒20m、60ml國(guó)產(chǎn)

豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  D283 Med(腦髓母瘤)5×106cells/瓶×2

注意事項(xiàng)：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。