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注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個(gè),0.22μm)、濾膜(水系1個(gè),0.45μm)、
鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個(gè),2mL)、超純水。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
6 磷酸葡萄糖脫氫酶EC1.1.1.49 |
10KU/瓶 |
BH-01S3828 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:操作時(shí)間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗(yàn): X =99%;
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng);
7、測試面廣:可測動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BC-021(乳腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BC-022(乳腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人組織型纖維溶酶激活物(t-PA)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 Bcap-37(乳腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠金屬硫蛋白(MT) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BCA蛋白定量試劑盒500次國產(chǎn)
豬髓過氧化物酶(MPO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BCIP/NBT KitBCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒40ml國產(chǎn)
大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑40ml國產(chǎn)
人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BE(2)-M17(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BEL-7402(肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
兔去甲上腺素(NA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BEL-7405(肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人頭狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BEL-7404(肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
6 磷酸葡萄糖脫氫酶EC1.1.1.49PAR-1蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次
PAR-1蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
PAR-1蛋白**共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
PAR-1蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:25次
PAR-2蛋白表達(dá)流式 儀檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
人酸性成纖維生長因子1(aFGF-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 胚肺成纖維樣英文名稱:KMB
兔子堿性成纖維生長因子(bFGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 胚肺成纖維樣(男)英文名稱:HEL1
小鼠三磷酸腺苷(ATP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 胚皮膚成纖維樣英文名稱:HES
大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 胚腎英文名稱:AAV-293
大鼠抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 胚腎英文名稱:293
人α烯醇化酶(α-enolase)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 胚胎肺成纖維(女)英文名稱:HEL2
人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 胚胎心臟組織來源英文名稱:HEH
人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 皮膚成纖維樣英文名稱:HSF
兔子組胺(HIS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 皮膚肥大完全培養(yǎng)基100mL
大鼠鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 破骨完全培養(yǎng)基100mL
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 皮下脂肪完全培養(yǎng)基100mL