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注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個,0.22μm)、濾膜(水系1個,0.45μm)、
鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個,2mL)、超純水。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
Cy3 -Rabbit Anti-Goat IgG |
50μl |
BH-01S3894 |
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗: X =99%;
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強;
7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細胞以及細胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
雞促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒48T/96T試劑盒 USMC(大鼠血管平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2
人補體片斷4b(C4b)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 V5 Tag IP/Co-IP Kit/V5標簽**沉淀試劑盒25次試劑盒
人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 V5標簽**親和介質(zhì)125ul國產(chǎn)
人血纖蛋白原(Fbg)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 V79(倉鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 VCaP(前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 VE(血管內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2
大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Vero(非洲綠猴腎細胞)5×106cells/瓶×2
流感A 型IgM(FLU-A IgM)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 WB-F344(大鼠肝上皮樣干細胞)5×106cells/瓶×2
人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠ-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 WERI-Rb-1(視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人乙酰肝素酶(HPA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Western Blot封閉液Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk)100ml、500ml100ml、500ml
人磷脂酶A2(PLA-2)Elisa 試劑盒96T/48T試劑盒 Western Blot封閉液Ⅰ(BSA,pH7.5)/Blocking Buffer(BSA)500ml100ml、500ml
Cy3 -Rabbit Anti-Goat IgG載玻片 HISTONE H3蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
冰凍切片組織HISTONE H3蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
石蠟切片組織HISTONE H3蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
HISTONE H3蛋白表達比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次
HISTONE H3蛋白表達熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次
豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BC-019(乳腺癌) 5×106cells/瓶×2
大鼠***腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BC-020(乳腺癌) 5×106cells/瓶×2
牛血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BC-021(乳腺癌) 5×106cells/瓶×2
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BC-022(乳腺癌) 5×106cells/瓶×2
人尿肌酐(UCR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BE(2)-M17(神經(jīng)母瘤) 5×106cells/瓶×2
人瘤相關(guān)抗原(TAA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BGC-803(胃癌) 5×106cells/瓶×2
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 C918(眼脈絡(luò)黑色素瘤) 5×106cells/瓶×2
豬可溶性間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CAL-27(舌鱗癌) 5×106cells/瓶×2
大鼠溶菌酶(LZM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 LS 180(結(jié)腸腺癌) 5×106cells/瓶×2
人鉤端螺旋體抗體(Lep-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 COLO 201(結(jié)直腸腺癌) 5×106cells/瓶×2
犬轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CNE-2Z(鼻咽癌) 5×106cells/瓶×2