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操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計的實(shí)驗(yàn)方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
產(chǎn)品名稱 |
eNOS Phospho-Ser1177 Antibody |
規(guī)格 |
詳見說明 |
貨號 |
BH-01S4027 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細(xì)胞或組織樣品的制備:培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實(shí)驗(yàn)時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
10、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
試劑使用須知:
(1)請參照相關(guān)法規(guī)、文獻(xiàn)、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進(jìn)行**操作。
(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。
(4)購買后,請務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項;做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項,做好必要的**對策;對沒有標(biāo)明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進(jìn)行操作;必須帶好防護(hù)用具,小心翼翼進(jìn)行操作。
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 主動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠降鈣素受體(CTR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 主動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
荊豆凝集素(UEA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
人單胺氧化酶A(MAOA)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 臍靜脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 臍動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
小鼠凋亡抑制基因(Bcl-2)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
植物25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 腹膜****內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
犬促黃體生成**(LH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 髂動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
eNOS Phospho-Ser1177 Antibody50mL DEAE交換介質(zhì) DEAE Medium 常溫干燥封袋保存
1袋 顯影粉 Developing Solution,Powder 室溫避光保存
1瓶 Calu-1 株 Calu-1 低溫運(yùn)輸和保存
2 ug pET-3a pET-3a 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pBAD His A pBAD His A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
125mL RIPA Buffer with Triton and Glycerol,2X RIPA Buffer with Triton and Glycerol,2X 常溫保存
1mg 二硫鍵異構(gòu)酶,人 Disulfide Isomerase -70℃保存
100uL Aminoally-dUTP溶液 (10 mM) Aminoally-dUTP Solution -20℃保存
胞漿微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
胞漿微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
胞核微型RNA(Pre-RNA)電泳法分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
胞核微型RNA(Pre-RNA)超濾法分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
微型RNA(miRNA)擴(kuò)增試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次