抗體的種類：

抗體是在抗原刺激下產生的，體液性抗體由B淋細胞系產生。根據(jù)其化學結構和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多，對D的功能了解較少。

（1） IgG：是血清中濃度大的一類球蛋白，約占疫球蛋白含量的70～80%，50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后，其產生時間僅次于IgM。在抗體介導的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體，分子量16萬～18萬，可以通過兔的胎盤，但不能通過豬和牛的胎盤。在體內可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學反應中，參與沉淀反應、凝集反應、補體結合反應和中和反應。

（2） IgM：由5個球蛋白單位組成的五聚體，在血清中的含量僅次于IgG，分子量90萬，是體內大的球蛋白?？乖醮未碳C體后，IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG，主要分布在血管內，可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細胞及中和病毒的作用。因其是五聚體，免作用很強，是IgG的100倍，但由于含量僅為IgG的1/10，且持續(xù)時間短，所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學反應中，參與凝集反應和補體結合反應。

（3） IgA：有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中，分子量約為17萬，亦稱為血清型IgA，有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中，如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液，以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA，由存在于粘膜和組織上的漿細胞產生，分子量40萬，含量較單體高6～８倍，是粘膜的重要防御因素，可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

（4） IgE：是一種特殊的糖蛋白，為單位體結構，分子量19萬，由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結中的漿細胞所形成，在血清中含量甚微，是一種致敏抗體，容易吸附在**表面，當與相應抗原結合所引起過敏反應。在機體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。

別    名   ALK SMase; Alk-SMase; Alkaline sphingomyelin phosphodiesterase; E-NPP 7; Ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 7; Ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase family member 7; ENPP7; ENPP7_HUMAN; Intestinal alkaline sphingomyelinase; NPP-7.
英文名稱  Anti-ENPP7

中文名稱  堿性鞘磷脂酶7抗體

濃    度  1mg/1ml

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  1mg/1ml    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat, Rabbit

產品類型  一抗

研究領域  腫瘤 細胞生物 **學 染色質和核信號 細胞周期蛋白 表觀遺傳學 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 50kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ENPP7

亞    型  IgG 

本公司產品僅用于科研實驗。

抗體的熒光標記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結合。與FITC結合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應抗原的存在。FITC具有很高的量子產量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳酸氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體反應特點：

1.高度特異性，特異性是抗原抗體反應的主要特征，特定抗原決定簇只與特定抗體結合；

2.可逆性:抗原與抗體結合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為：Ag+AbAg·Ab；

3.適當濃度和比例；

4.敏感性:在測定血清中某一物質的含量時，化學比色法的敏感度為mg/ml水平，酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml，定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。

抗體反應的因素：

1.電解質 ：抗原抗體特異結合后，膠體粒便可發(fā)生脫水作用，此時易受電解質影響，如有適當濃度的電解質存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚，于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。

2.酸堿度:合適的pH為6-8。

3.溫度:37℃通常是抗原體反應溫度。

實驗步驟：

1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗，pbs 浸泡5 分鐘（如需采用抗原修復，在此步驟后進行）。

3、3%雙氧水去離子水（無色液體）孵育15-20 分鐘，以消除內源性過氧物酶活性。

4、滴加試劑A（藍色液體）室溫孵育15-20 分鐘，傾去，勿洗。

5、滴加適當比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。

6、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色（DAB 或AEC）

12、自來水充分沖洗。

13、如果需要，可進行復染，脫水，透明。

14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>

抗體分子標記技術：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。

CK1  細胞角蛋白1抗體 0.1ml

CDO1  半胱氨酸雙加氧酶1抗體 0.2ml

EAAT3  膠質細胞谷氨酸運載蛋白3抗體(神經/上皮細胞谷氨酸運載蛋白) 0.1ml

FABP4  脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白 0.1ml

MAP65/ASE 1  擬南芥MAP65蛋白抗體 0.2ml

SQSTM1/p62  泛素結合蛋白P62抗體 0.2ml

CPN10  葉綠體伴侶蛋白抗體（蘋果） 1ml

PDGFC/VEGF E  血小板源性生長因子C抗體 0.2ml

DDB2  DNA損傷結合蛋白2抗體 0.1ml

EphA1/Ephrina1/Ephrin A1 Receptor  內皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶A抗體（腫瘤壞死因子α誘導蛋白4） 0.1ml

FLIP/c FLIP  凋亡調節(jié)基因之一抗體 0.1ml

Newcastle disease virus  雞新城疫疫苗（雞瘟4型混合病毒）抗體 1ml

EXTL  外生性骨疣樣蛋白2抗體 0.2ml

堿性鞘磷脂酶7抗體3--2-氯吡分子式：128.56分子量： C5H5ClN2英文名稱：3- amino -2-CAS號：6298-19-7

2-甲喹啉分子式：143.19分子量： C10H9N英文名稱：2- methyl groupCAS號：91-63-4

3--5-(4-溴)異噁唑分子式：239.07分子量： C9H7BrN2O英文名稱：3- - -5- (4- Bromophenyl) isoxazoleCAS號：6525-98-0

反-十氫萘分子式：138.25分子量： C10H18英文名稱：Trans ten hydrogenation of naphthaleneCAS號：493-02-7

鋁酞菁英文名稱：Aluminum phthalocyanineCAS號：14154-42-8分子式：574.97分子量： C32H16AlClN8

鹽藥根堿英文名稱：Hydrochloric acidCAS號：6681-15-8分子式：373.8301分子量：C20H20ClNO4

性紅33英文名稱：Acid red 33CAS號：3567-66-6分子式：467.38分子量： C16H11N3Na2O7S2

4-甲氧-3,5-二甲-2-吡甲分子式：167.21分子量： C9H13NO2英文名稱：4- methyl -3,5- two methyl -2- pyridine methanolCAS號：86604-78-6

1-[(2-乙己)氧]-4-甲氧分子式：236.35分子量： CH3OC6H4OCH2CH(C2H5)(CH2)3CH3英文名稱：1-[(2- ethylhexyl) oxygen]-4- dimethoxybenzeneCAS號：146370-51-6

紫杉英文名稱：TaxolCAS號：33069-62-4分子式：853.91分子量：C47H51NO14