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熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 |
轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 |
英文名稱 |
Anti-E2F1 |
貨號(hào) |
BH-K013517 |
英文名稱 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體
中文名稱 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體
別 名 E2F 1; E2F transcription factor 1; E2F-1; E2f1 E2F transcription factor 1; KIAA4009; mKIAA4009; OTTHUMP00000030661; PBR 3; PBR3; PRB binding protein E2F 1; PRB-binding protein E2F-1; RBAP 1; RBAP-1; RBAP1; RBBP 3; RBBP-3; RBBP3; RBP 3; RBP3; Retinoblastoma associated protein 1; Retinoblastoma binding protein 3; Retinoblastoma-associated protein 1; Retinoblastoma-binding protein 3; Transcription factor E2F1; E2F1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 46kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human E2F1
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
CCL27/CTACK 皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子抗體 0.2ml
Phospho-cdc25C (Ser216) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 0.1ml
AU5 tag AU5 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
CYP450 細(xì)胞色素P450單氧化酶抗體 0.1ml
phospho-EGFR (Tyr1110) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
ERK1/MAPK3 絲裂原活化蛋白激酶3抗體 0.1ml
FAST kinase Fas活化的絲/蘇氨酸激酶抗體 0.1ml
CHFR 泛素連接酶蛋白CHFR抗體 0.2ml
phospho-CHEK1(Ser317) 磷酸化細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶1抗體 0.1ml
CSMD1 CSMD1抗體 0.2ml
phospho-DNA PK/PRKDC(Ser2612) 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體 0.1ml
5-HTR4 5-羥色胺受體4抗體 0.1ml
ACOX1 過氧化物酶?;o酶A氧化酶1抗體 0.2ml
轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體環(huán)己氯鎂英文名稱:Cyclohexyl chlorideCAS號(hào):931-51-1分子式:142.91分子量: C6H11ClMg
氘代芘英文名稱:Deuterium substituted pyreneCAS號(hào):1718-52-1分子式:212.31分子量: C16D10
精吡氟禾草靈英文名稱:Fluazifop-p-butylCAS號(hào):79241-46-6分子式:383.36分子量: C19H20F3NO4
血根堿英文名稱:SanguinarineCAS號(hào):2447-54-3分子式:332.32946分子量:C20H14NO4+
1-乙-4-[(4-正丙烷)乙炔]分子式:248.36分子量: C19H20英文名稱:1- ethyl -4-[(4- phenyl group) acetylene groupCAS號(hào):102225-55-8
聚對(duì)二甲分子式:分子量:英文名稱:ParyleneCAS號(hào):
1,1'-二庚-4,4'-二溴聯(lián)吡鎓分子式:514.39分子量: C24H38Br2N2英文名稱:1,1'- two -4,4'- heptyl bromide with pyridiniumCAS號(hào):1555692
乙二胺四乙酸二鉀分子式:372.24分子量: C10H14K2N2O8#英文名稱:Two potassium EDTACAS號(hào):2001-94-7
延齡草苷英文名稱:TrillinCAS號(hào):14144-06-0分子式:576.7658分子量:C33H52O8
2,6-二[(4S)-4--2-惡唑啉]吡分子式:369.42分子量: C23H19N3O2英文名稱:2,6- two [(4S) -4- phenyl -2- oxazolinyl pyridine]CAS號(hào):174500-20-0