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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
內(nèi)皮素-1抗體 |
英文名稱 |
Anti-ET-1 |
貨號 |
BH-K013495 |
英文名稱 內(nèi)皮素-1抗體
中文名稱 內(nèi)皮素-1抗體
別 名 Endothelin-1; Big endothelin 1; EDN 1; EDN1; EDN1 protein; Endothelin1; ET 1; ET1; OTTHUMP00000039245; PPET1; Preproendothelin 1; Preproendothelin1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 心血管 細胞生物 **學 神經(jīng)生物學 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 2.5kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ET-1(CSCSSLMDKECVYFCHLDIIW Disulfide bridges C1-C15, C3-C11)
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
SORBS2/ArgBP2 精氨酸結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
Renin 腎素/血管緊張素形成酶Ren1抗體 0.1ml
GNLY/NKG5 顆粒溶素抗體 0.2ml
M Cadherin M鈣粘附分子抗體 0.1ml
Mitochondrial ribosomal protein L11 線粒體核糖體蛋白L11抗體 0.2ml
IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10抗體 0.2ml
Plakophilin 1 橋粒斑菲素蛋白1抗體 0.2ml
IGFBP9/CCN3 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白9 0.1ml
PRUNE/DRES17 乳腺癌相關蛋白DRES17抗體 0.2ml
POT1 端粒保護蛋白1抗體 0.2ml
AIFM3 凋亡誘導因子3抗體 0.2ml
Cipar1 前列腺雄抑制信號蛋白1抗體 0.2ml
ZNF415 鋅指蛋白415抗體 0.2ml
內(nèi)皮素-1抗體5-氯-3-吡分子式:129.54分子量: C5H4ClNO英文名稱:5- -3- pyridineCAS號:74115-12-1
N-(4-甲酰-3-吡)-2,2-二甲丙酰胺分子式:206.24分子量: C11H14N2O2英文名稱:N- (4-, -3-) - 2,2- two - methyl acrylateCAS號:127446-35-9
2-喹啉分子式:205.26分子量: C15H11N英文名稱:2- phenyl groupCAS號:612-96-4
鄰二甲酰分子式:162.15分子量: C8H6N2O2英文名稱:Ortho phenyl twoCAS號:1445-69-8
間四氮唑分子式:161.16分子量: C7H7N5英文名稱:間四氮唑CAS號:73732-51-1
4-異喹啉分子式:144.18分子量: C9H8N2英文名稱:4- amino groupCAS號:23687-25-4
性媒介紅S-80英文名稱:Acid medium red S-80CAS號:分子式:分子量:
甲硝唑分子式:171.15分子量: C6H9N3O3英文名稱:MetronidazoleCAS號:443-48-1
雙去氧姜黃素英文名稱:BisdemethoxycurcuminCAS號:33171-05-0分子式:308.32794分子量:C19H16O4
氯酸鍶分子式:254.52分子量: Cl2O6Sr英文名稱:Strontium perchlorateCAS號:2151926