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熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
生長因子受體結合蛋白2相關接頭蛋白2抗體 |
英文名稱 |
Anti-GRAP2 |
貨號 |
BH-K013859 |
英文名稱 生長因子受體結合蛋白2相關接頭蛋白2抗體
中文名稱 生長因子受體結合蛋白2相關接頭蛋白2抗體
別 名 Adapter protein GRID; GADS; GADS protein; GRAP-2; GRAP2; GRAP2_HUMAN; GRB-2-like protein; GRB2-related adapter protein 2; GRB2-related adaptor protein 2; GRB2-related protein with insert domain; GRB2L; GRBLG; GrbX; Grf-40; Grf40 adapter protein; Grf40; GRID; Growth factor receptor-binding protein; Growth factor receptor-bound protein 2-related adaptor protein 2; GRPL; Hema; Hematopoietic cell-associated adapter protein GrpL; Hematopoietic cell-associated adaptor protein GRPL; Mona; P38 antibody Protein GADS; SH3-SH2-SH3 adapter Mona; SH3-SH2-SH3 adaptor molecule.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 腫瘤 信號轉導 轉錄調節(jié)因子 G蛋白偶聯(lián)受體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 38kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human GRAP2
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
A172(人腦膠質瘤細胞)B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細胞)
植物桿 Lactobacillus plantarum根瘤
疣孢漆斑 Myrothecium verrucaria大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum
MA, 小鼠星形膠質細胞非洲綠猴腎細胞
黑曲霉 Aspergillus nigerPLC/PRF/5(人肝亞力山大細胞)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae植物桿 Lactobacillus plantarum
不產(chǎn)色鏈霉 Streptomyces achromogenes黑曲霉 Aspergillus niger
日本根霉 Rhizopus japonicus多孢木霉
易脆毛霉 Mucor fragilis彎曲假單胞 Pseudomonas flectens
大鼠神經(jīng)膠質細胞完全培養(yǎng)基小鼠黑色素瘤細胞
宇佐美曲霉 Aspergillus usamiiMM, 小鼠小膠質細胞
泡盛曲霉 Aspergillus awamori大鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基
毛柄**(金針菇) Flammulina velutipes酸球亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis
生長因子受體結合蛋白2相關接頭蛋白2抗體脫氧核糖胸腺嘧啶核苷酸 英文名稱:DNA Thymine Nucleotides 保存:-20℃ 規(guī)格:20mg/支
甘露聚糖肽 英文名稱:Mannan peptide 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
酪蛋白 英文名稱:Casein 保存:-20℃ 規(guī)格:7g/瓶
利福布汀 英文名稱:Leigh Fob Dean 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
地紅 英文名稱:Dirithromycin 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
辛烷磺酸鈉 英文名稱:Octane sulfonic acid sodium salt 保存:-20℃ 規(guī)格:5g
替拉寧 英文名稱:Teicoplanin 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
異丙醇 英文名稱:Isopropyl alcohol 保存:-20℃ 規(guī)格:1ml
發(fā)酵冬蟲夏草粉 英文名稱:Fermented Cordyceps powder 保存:-20℃ 規(guī)格:0.5g
榧子 英文名稱:Torreya 保存:-20℃ 規(guī)格:3g
徐長卿 英文名稱:Cynanchum paniculatum 保存:-20℃ 規(guī)格:0.5g
地耳草 英文名稱:Herba Hyperici japonici 保存:-20℃ 規(guī)格:1g