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熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產品僅用于科研實驗。
產品名稱 |
生長分化因子10抗體(TGF-β超家族10) |
英文名稱 |
Anti-GDF10 |
貨號 |
BH-K013871 |
英文名稱 生長分化因子10抗體(TGF-β超家族10)
中文名稱 生長分化因子10抗體(TGF-β超家族10)
別 名 BIP; BMP 3b; BMP3B; Bone inducing protein; Bone morphogenetic protein 3b; GDF 10; growth differentiation factor 10.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Guinea Pig
產品類型 一抗
研究領域 腫瘤 **學 信號轉導 干細胞 細胞周期蛋白 轉錄調節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 12kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human GDF10
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,產生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
黑曲霉 Aspergillus niger動物雙歧桿 Bifidobacterium animalis
人呼吸道上皮細胞完全培養(yǎng)基解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica
宛氏擬青霉 Paecilomyces variotii玉蜀黍赤霉 Gibberella zeae
彩虹預染中分子量蛋白Marker小鼠腸微血管細胞完全培養(yǎng)基
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細胞)
熒光假單胞 Pseudomonas fluorescens植物桿 Lactobacillus Plantarum
苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti紅曲霉 Monascus anka
米根霉 Rhizopus oryzae豬霍亂沙門氏孔成道夫變種 Salmonella cholerae-suis var. kunzendorf
苜蓿中華根瘤大麗花輪枝孢
KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞黃直鏈霉 Streptomyces flavorectus
葡萄酒有孢漢遜酵母 Hanseniaspora uvarumMulti-tagged Protein Lysate/多標簽蛋白裂解液
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae溶藻弧 Vibrio alginolyticus
草菇 Volvariella bombycina異常漢遜酵母 Hansenula anomala
生長分化因子10抗體(TGF-β超家族10)脫氧核糖胞嘧啶核苷酸鈉 英文名稱:DNA cytosine nucleotide sodium 保存:-20℃ 規(guī)格:20mg/支
蚓激酶 英文名稱:Earthworm kinase 保存:-20℃ 規(guī)格:26000單位/支
四硫磺酸鈉亮綠對照培養(yǎng)基基礎 英文名稱:Four sulfonic acid sodium light green contrast medium base 保存:-20℃ 規(guī)格:4.5g/100ml
環(huán)孢素系統(tǒng)適用性對照品 英文名稱:Cyclosporine system suitability control products 保存:-20℃ 規(guī)格:50mg
米諾環(huán)素 英文名稱:Minocycline 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
3-乙氧基-4-羥基甲醛 英文名稱:3- ethoxy - 4 - hydroxy benzaldehyde 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
巴龍 英文名稱:Barone mycin 保存:-20℃ 規(guī)格:200mg
甲醇 英文名稱:Methanol 保存:-20℃ 規(guī)格:1ml
土牛膝 英文名稱:Achyranthes aspera 保存:-20℃ 規(guī)格:5g
桃仁(山桃) 英文名稱:Peach (Prunus) 保存:-20℃ 規(guī)格:1g
金盞銀盤 英文名稱:Biochemi 保存:-20℃ 規(guī)格:2.0g
菝葜 英文名稱:Smilax China 保存:-20℃ 規(guī)格:2g