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熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 |
巨軸索神經(jīng)病蛋白GAN抗體 |
英文名稱 |
Anti-Gigaxonin |
貨號(hào) |
BH-K014035 |
英文名稱 巨軸索神經(jīng)病蛋白GAN抗體
中文名稱 巨軸索神經(jīng)病蛋白GAN抗體
別 名 FLJ38059; GAN; GAN1; Kelch-like protein 16; giant axonal neuropathy; KLHL16; GAN_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 68kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Gigaxonin
亞 型 IgG
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看效果。
5、如果成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)疫。疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis
桔橙小單孢 Micromonospora aurantiaca
胰蛋白酶(含100mL 酶解緩沖液)10mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae紫色變異鏈霉 Streptomyces violovariabilis
NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系檸檬綠木霉
猴豌豆根瘤 Rhizobium leguminosarum
人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶蘇云金芽胞桿東北亞種 Bacillus thuringiensis subsp. tohokuensis
茯苓 Poria cocos
單核細(xì)胞增生李氏桿 Listeria monocytogenes
中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)
普雷恩毛霉 Mucor prainii楊奇青霉 Penicillium janczewskii
香菇 Lentinula edodes尖孢鐮刀棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum
植物桿 Lactobacillus plantarum涇陽(yáng)鏈霉 Streptomyces jingyangensis
巨軸索神經(jīng)病蛋白GAN抗體葡萄球增肉湯/Staphylococcus Enrichment Broth凝固酶陽(yáng)生葡萄球選擇性增 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
貓腎上細(xì)胞英文名稱:CRFK
lovo, 人結(jié)腸細(xì)胞
Schenk&Hildebrandt MediumBR10升 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠虹膜色素上細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
人黑色素瘤細(xì)胞英文名稱:MV3
特殊蛋白胨/Peptone SpecialBR 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠小腸隱窩上細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠胰腺導(dǎo)管上細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
HL-60/急性髓性白血病細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
大豆酪蛋白葡萄糖卵磷酯吐溫80培養(yǎng)基/SCDLP液體培養(yǎng)基/SCDLP Broth Medium妝品檢驗(yàn)中樣品制備、增 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口