咨詢電話:18117197628
熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
磷酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體 |
英文名稱 |
Anti-phospho-GATA4 (Ser262) |
貨號 |
BH-K014117 |
英文名稱 磷酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體
中文名稱 磷酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體
別 名 GATA4 (phospho S262); p-GATA-4(Ser 262); p-GATA-4(Ser262); GATA binding factor 4; GATA 4; GATA4; GATA-4; Transcription factor GATA-4; GATA-binding factor 4; Gata4; GATA4_HUMAN; GATA-binding factor 4.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 **學 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶 表觀遺傳學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 49kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human GATA4 around the phosphorylation site of Ser262
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
CAL-27(人舌鱗)5×106cells/瓶×2
高氏合成1號瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 供放線培養(yǎng)用。
聚蛋白胨/多聚蛋白胨/多價蛋白胨/PolypeptoneBR250/500/1000克國產(chǎn)/進口
周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A (CDKN2A)
Littman瓊脂/Littman Agar真的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
信號素5B(SEMA5B)重組蛋白英文名稱:Recombinant Semaphorin 5B (SEMA5B)
親環(huán)素A(CYPA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclophilin A (CYPA)
大鼠胰島完全培養(yǎng)基100mL
人腺英文名稱:MDA-MB-453
布氏肉湯 規(guī)格: 250g 用途: 用于空腸彎培養(yǎng)及運動性觀察。(GB、ISO)
倉鼠腎成纖維英文名稱:BHK-21 [C-13]
磷酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體大鼠肝動脈平滑肌完全培養(yǎng)基100mL
PIEC(豬髖動脈內(nèi) ) 5×106cells/瓶×2
NCI-H838(人非小肺) 5×106cells/瓶×2gersion
BGS瓊脂/BGS Agar沙門氏分離培養(yǎng) 250克 國產(chǎn)/進口
NCI-H1650(人非小肺) 5×106cells/瓶×2gersion
IMR-32(人神經(jīng)母瘤) 5×106cells/瓶×2
人結(jié)腸耐奧沙利鉑耐藥株英文名稱:HCT116/L
COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)的腎) 5×106cells/瓶×2
人非小肺英文名稱:NCI-H1299
MDCK(犬腎) 5×106cells/瓶×2gersion
MR-VP培養(yǎng)基/MR-VP試驗用培養(yǎng)基/緩沖葡萄糖肉湯/葡萄糖磷酸鹽肉湯/MR VP Broth腸桿科細的甲基紅和VP試驗 250克 國產(chǎn)/進口
MCF 7B(人腺) 5×106cells/瓶×2