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熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產品僅用于科研實驗。
產品名稱 |
中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體 |
英文名稱 |
Anti-IFFO |
貨號 |
BH-K014247 |
英文名稱 中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體
中文名稱 中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體
別 名 DKFZp586I2223; FLJ20703; HOM TES 103; HOM TES 103 tumor antigen; HOM TES 103 tumor antigen like; IFFO1; IFFO1_HUMAN; Intermediate filament family orphan 1; Intermediate filament family orphan; Intermediate filament like MGC:2625; MGC117359; OTTHUMP00000180568; OTTHUMP00000180569; OTTHUMP00000180570; OTTHUMP00000233401; Tumor antigen HOM-TES-103.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
產品類型 一抗
研究領域 細胞生物
蛋白分子量 predicted molecular weight: 62kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human IFFO
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,產生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
酵母浸出膏/酵母浸膏/酵母提取物/酵母萃取物/酵母抽提物/水溶性酵母浸膏/Yeast extractBR500克國產/進口
Eca-109(人食管)5×106cells/瓶×2
牛津瓊脂基礎 規(guī)格: 100g 用途: 用于單核增生李斯特氏的選擇性分離(SN0184-2005)。
大鼠星形膠質英文名稱:Rat Astrocytes
Skirrow瓊脂配套試劑 規(guī)格: 10支/盒 用途: 每支添加于100mL的 Skirrow瓊脂基礎中
BABL/C小鼠胚胎英文名稱:BABL/C2
人頸表皮英文名稱:MS751
胱天蛋白酶9(CASP9)重組蛋白英文名稱:Recombinant Caspase 9 (CASP9)
3% NaC1胰胨水發(fā)酵管BR20支國產/進口
腫瘤壞死因子配體超家族成員7(TNFSF7)重組蛋白英文名稱:Recombinant Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 7 (TNFSF7)
M17肉湯/M17 Broth牛奶和制品中酸檢測和分離培養(yǎng)250克國產/進口
中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium melilotiRTE(大鼠氣管上皮)
IV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)意大利酵母 Saccharomyces italicus
豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna根瘤 Rhizobium sp.
熱帶假絲酵母 Candida tropicalisCOLO 205(人結腸)
毛柄**(金針菇) Flammulina velutipesHCG803/胃
大鼠肝動脈內皮完全培養(yǎng)基綠色木霉=木素木霉
小紅酵母 Rhodotorula MiuntaA2(人腺樣囊性)
紫芝 Ganoderma japonicum香菇 Lentinula edodes
抗生鏈霉 Streptomyces antibioticus熒光假單胞 Pseudomonas fluorescens
小鼠白血病小鼠腎系膜完全培養(yǎng)基
名稱HT-29, 人結腸