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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
跨膜蛋白BRI抗體 |
英文名稱 |
Anti-ITM2B |
貨號 |
BH-K014365 |
英文名稱 Anti-ITM2B
中文名稱 跨膜蛋白BRI抗體
別 名 ABRI; ABri/ADan amyloid peptide; BRI 2; BRI; BRI2; BRICD 2B; BRICD2B; BRICHOS domain containing 2B; E25B; E3 16; E3-16; FBD; Integral membrane protein 2B; ITM 2B; ITM2B ; ITM2B_HUMAN; Protein E25B; Transmembrane protein BRI.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 **學 神經(jīng)生物學 Alzheimer's
蛋白分子量 predicted molecular weight: 30kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ITM2B
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
羊抗人IgG-RBITC0.5ml支
Choline chloride 化膽堿100g瓶
鈣熒光探針Fluo-3, AM1 mg支
Hypericin 金絲桃素548-04-910mg
pH值標準液(PH10.01)500ml瓶
核蛋白抽提試劑盒100T盒
Senegenin 遠志皂苷元2469-34-320mg
1.5ml 樣品瓶,藍蓋,開孔,帶刻度100支盒
Acifluorfene 三氟羧草50g瓶
X-α-gal (X-a-gal)5-溴-4--3-吲哚-a-D-半乳糖苷100mg瓶
糖原PAS染色液(過碘酸-雪夫染色液)50ml×2瓶
Sundan BlackB 蘇丹5g瓶
無去離子水 For Cell Culture100ml瓶
跨膜蛋白BRI抗體TT(人甲狀腺導(dǎo)管)人胃順鉑耐藥株
桿屬 Lactobacillus sp.大鼠表皮角化完全培養(yǎng)基
米根霉 Rhizopus oryzae豬霍亂沙門氏孔成道夫變種 Salmonella cholerae-suis var. kunzendorf
日本根霉產(chǎn)色鏈霉 Streptomyces chromogenes
蘇云金芽胞桿鲇澤變種 Bacillus thuringienis var. aisawai梭形芽孢桿 Bacillus fusiformis
人間充質(zhì)干-脂肪NCI-H23(人非小肺)
直絲紫鏈霉 Streptomyces rectiviolaceus 名稱
HuTu-80(人十二脂腸腺)苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti
IMR-32(人神經(jīng)母瘤)胰蛋白酶(含10mL 酶解緩沖液)
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis費氏中華根瘤 Sinorhizobium fredii
球擬圓酵母 Torulopsis globosa酸球 Lactococcus lactis