熒光技術的實驗步驟：

一、準備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。

2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

公司專業(yè)供應的抗體，抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品，品質**，價格實惠，多種規(guī)格供應，售后完善。本公司產品僅用于科研實驗。

英文名稱  Anti-IRE1a

中文名稱  內質網核信號轉導蛋白a1抗體

別    名  Endoplasmic reticulum (ER) to nucleus signalling 1; Endoplasmic reticulum to nucleus signaling 1; Endoplasmic reticulum-to-nucleus signaling 1; Endoribonuclease; ER to nucleus signaling 1; ERN 1; ERN1; ERN1_HUMAN; hIRE 1p; hIRE1p; Inositol requiring 1; Inositol requiring protein 1; Inositol-requiring protein 1; IRE-1; IRE 1; IRE 1a; IRE 1P; Ire1 alpha; Ire1-alpha; IRE1a; Ire1alpha; IRE1P; MGC163277; Protein kinase/endoribonuclease; Serine/threonine protein kinase/endoribonuclease IRE1.

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  1mg/1ml    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

產品類型  一抗

研究領域  細胞生物 信號轉導 激酶和磷酸酶 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 105kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human IRE1a

亞    型  IgG 

抗體制備過程：

1.材料與試劑

  a．提取的動物 Ig

  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑

  c．青霉素和鏈霉素

  d．實驗動物 兔

  e．其它材料及試劑

2、選擇實驗活體。

3、進行動物實驗。

4、試取血樣進行測試，查看效果。

5、如果成功，殺死實驗活體，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

實驗原理 :

（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或導致病理損傷。然而，抗體可通過與病毒或的特異性結合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 

（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。 

（3）結合細胞：不同類別的球蛋白，可結合不同種的細胞，參與應答。 

（4）可通過胎盤及粘膜：球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動

球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染的主要因素。 

（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺機體產生應答的性能。不同的球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 

（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。

抗體的生活習性：

(1)結合特異性抗原：抗體與其他球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合，在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應?？贵w是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。

(2)激活補體：抗體與相應抗原結合后，借助暴露的補體結合點去激活補體系統、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。

(3)結合細胞：不同類別的球蛋白，可結合不同種的細胞，產生不同的疚，參與疫應答。

(4)可通過胎盤及粘膜：球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染疫的主要因素。

(5)具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺激機體產生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。

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