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熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 |
胰島素抗體 |
英文名稱 |
Anti-Insulin |
貨號(hào) |
BH-K014571 |
英文名稱 Anti-Insulin
中文名稱 胰島素抗體
別 名 ILPR; INS; Insulin A chain; Insulin B chain; Insulin A chain; Insulin precursor; IRDN; Proinsulin; Proinsulin precursor; IDDM2; INS_HUMAN; MODY10.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 生長(zhǎng)因子和** 糖尿病 ***病 新陳代謝
蛋白分子量 predicted molecular weight: 5.77754kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Insulin from porcine pancreas
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看效果。
5、如果成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
大鼠膀胱上皮完全培養(yǎng)基100mL
卵磷脂(大豆)/大豆卵磷脂/磷脂酰膽堿/L-a-磷脂酰膽酰/蜂王漿/SPCBR,PC=26%250/25/100/1000克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
肌醇測(cè)定培養(yǎng)基/Inositol Assay Broth嬰幼兒配方食品和粉中肌醇測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Rambach瓊脂250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
10% NaC1胰胨水發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠肺大靜脈內(nèi)皮完全培養(yǎng)基100mL
3.5% NaC1甘露醇發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)
肌球蛋白輕鏈1(MYL1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Myosin Light Chain 1, Alkali, Fast Skeletal (MYL1)
熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白英文名稱:Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)
血小板內(nèi)皮粘附分子1(PECAM1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1)
EL4(小鼠瘤)5×106cells/瓶×2
16HBE(人支氣管上皮樣)5×106cells/瓶×2
胰島素抗體QGY-7703(人肝)中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii
BT-20(人腺)小鼠卵巢成纖維完全培養(yǎng)基
檸檬串珠 Leuconostoc citreum熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
紅色鏈孢囊 Streptosporangium rubrum毛柄**(金針菇) Flammulina velutipes
臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis鞘氨醇桿屬 Sphingobacterium sp.
NCI-H2087(人非小肺腺)戊糖桿 Lactobacillus pentosus
苜蓿中華根瘤透質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液)
苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti泡盛曲霉 Aspergillus awamori
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠腸靜脈內(nèi)皮完全培養(yǎng)基
香菇 Lentinula edodes頂孢霉 Cephalosporium acremonium
酸球亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae