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熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
類固醇受體激活蛋白1抗體 |
英文名稱 |
Anti-KAT13A/SRC1 |
貨號 |
BH-K014641 |
英文名稱 Anti-KAT13A/SRC1
中文名稱 類固醇受體激活蛋白1抗體
別 名 ASV; bHLHe74; c SRC; Class E basic helix-loop-helix protein 74; F SRC 1; Hin 2 protein; Hin2 protein; MGC129719; MGC129720; mNRC 1; NCoA 1; NCoA-1; Ncoa1; NCOA1_HUMAN; Nuclear receptor coactivator 1; Nuclear receptor coactivator protein 1; NY REN 52 antigen; NY REN 52 antigen; p60 Src; pp60c src; Protein Hin 2; Protein Hin 2; Protein Hin-2; Protein Hin2; Proto oncogene tyrosine protein kinase Src; Renal carcinoma antigen NY REN 52; Renal carcinoma antigen NY-REN-52; RIP 160; RIP160; SRC 1; SRC-1; Steroid receptor coactivator 1; v src avian sarcoma (Schmidt Ruppin A 2) viral oncogene homolog.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 **學 染色質(zhì)和核信號 信號轉導 轉錄調(diào)節(jié)因子 新陳代謝 表觀遺傳學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 59kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human KAT13A
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
SABC(小鼠IgG)-FITC kit100-200T盒
200ul盒裝無濾芯吸頭,50盒/箱96支盒
蘇木素規(guī)染色液100ml瓶
β-Estradiol β- 雌二醇1g瓶
染色劑/染色液
Crocin 西紅花苷42553-65-120mg
Aldolase醛縮酶 (來源于兔肌肉)100U瓶
Citric acid 無水檸檬酸77-92-9100mg
Guanosine 5'-monophosphate disodium salt 鳥苷-5'-單磷酸二鈉5g瓶
CollagenaseⅣ 膠原酶Ⅳ100mg支
Metaphosphoric acid 偏磷酸100g瓶
Purpurin 羥基茜草素81-54-920mg
普魯士藍染色試劑盒(Perls stain,核固紅法)2×50瓶
類固醇受體激活蛋白1抗體蘇云金芽孢桿 Bacillus thuringiensisHela 299(人宮頸)
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus球毛殼 Chaetomium globosum
蘇云金芽胞桿庫爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki雙孢蘑菇
MS751(人頸表皮)結晶紫染色液
苜蓿中華根瘤馬杜拉放線 Actinomadura Sp.
植物桿 Lactobacillus plantarum根瘤
卡爾斯伯酵母 Saccharomyces carlsbergensisMiaPaCa-2, 人胰腺
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖-骨髓消化桿 Lactobacillus alimentarius
貝葉多孔釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
AM(人腺樣囊性(高轉移))HL-7702(人肝正常)
蘇云金芽孢桿 Bacillus thuringiensis費氏中華根瘤 Sinorhizobium fredii