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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2抗體 |
英文名稱 |
Anti-KIF20A/MKLP2 |
貨號 |
BH-K014671 |
英文名稱 Anti-KIF20A/MKLP2
中文名稱 有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2抗體
別 名 GG10 2; GG10_2; Kif20a; kinesin family member 20A; Kinesin like protein KIF20A; Kinesin-like protein 174; mitotic kinesin like protein 2; MKLP2; RAB6 interacting, kinesin like (rabkinesin6); Rab6-interacting kinesin-like protein; RAB6-INTERACTING PROTEIN, KINESIN-LIKE; RAB6KIFL; Rabkinesin 6; AA415432; FLJ21151.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞分化 細胞外基質(zhì)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 98kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human KIF20A
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
HO-8910(人卵巢)5×106cells/瓶×2
Cyanidin-3-O-Galactoside 矢車菊素-3-O-半乳糖苷27661-36-51mg
Bis-Tris5g瓶
Microcystin-RR 微囊藻RR111755-37-4100μg
甲苯胺藍溶液500ml瓶
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無粉一次性PVC手套 (50雙/盒)小號盒
蠶蛹蛋白胨BR250克國產(chǎn)/進口
5-Fluorocytosine 5-氟胞嘧啶25g瓶
Daphnoretin 西瑞香素2034-69-720mg
Baohuoside I 寶藿苷I113558-15-920mg
Glycine 甘氨酸1000g瓶
Uridine 5'-Diphosphate Trisodium Salt尿苷-5'-三磷酸三鈉19817-92-620mg
有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2抗體鏈球 Lactococcus lactisRaji,人Burkitt's瘤
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeC2C12(小鼠成肌)
豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠支氣管上皮完全培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti
戊糖桿 Lactobacillus pentosus植物桿 Lactobacillus plantarum
小鼠小腸隱窩上皮完全培養(yǎng)基TM4(正常小鼠睪Sertoli)
蘇云金芽胞桿阿萊亞種 Bacillus thuringiensis subsp. alesti大鼠胰腺星狀完全培養(yǎng)基
異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti
燕麥狀曲霉 Aspergillus avenaceus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
HEL(人紅白白血病)斯氏假單胞 Pseudomonas stutzeri
雙孢蘑菇釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae