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抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。
別 名 p-CD19(Ser227); CD19(phospho-Ser227); Antibody deficiency due to defect in CD19, included; AW495831; B lymphocyte antigen CD19; B lymphocyte surface antigen B4; B4; CD 19; CD19 antigen; CD19 molecule; Cd19 protein; Differentiation Antigen CD19; Leu 12; Leu12; Lymphocyte Surface Antigen; MGC109570; MGC12802; T-cell surface antigen Leu-12.
英文名稱 Anti-phospho-CD19(Ser227)
中文名稱 磷酸化CD19抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞表面分子 **細(xì)胞 b-**細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 59kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human CD19 around the phosphorylation site of Ser227 [LL(p-S)LE]
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:20-100 IF=1:50-200
亞 型 IgG
本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體的種類:
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度大的一類球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬~18萬,可以通過兔的胎盤,但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量僅次于IgG,分子量90萬,是體內(nèi)大的球蛋白。抗原初次刺激機體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強,是IgG的100倍,但由于含量僅為IgG的1/10,且持續(xù)時間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬,亦稱為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分子量40萬,含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬,由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。
磷酸二酯酶4D(PDE4D)elisa檢測試劑盒英文名稱:PDE4D ELISA Kit,英文縮寫:PDE4D,產(chǎn)品別名:磷酸二酯酶4D(PDE4D)ELISA檢測試劑盒,磷酸二酯酶4D(PDE4D)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
扣帶蛋白(CGN)elisa檢測試劑盒英文名稱:CGN ELISA Kit,英文縮寫:CGN,產(chǎn)品別名:扣帶蛋白(CGN)ELISA檢測試劑盒,扣帶蛋白(CGN)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
犁鼻1受體5(VN1R5)elisa檢測試劑盒英文名稱:VN1R5 ELISA Kit,英文縮寫:VN1R5,產(chǎn)品別名:犁鼻1受體5(VN1R5)ELISA檢測試劑盒,犁鼻1受體5(VN1R5)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
人抗谷氨酸脫羧酶抗體(Anti-GAD)elisa檢測試劑盒英文名稱:Anti-GAD ELISA Kit,英文縮寫:Anti-GAD,產(chǎn)品別名:人抗谷氨酸脫羧酶抗體(Anti-GAD)ELISA檢測試劑盒,人抗谷氨酸脫羧酶抗體(Anti-GAD)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
視黃醇結(jié)合蛋白4抗體
環(huán)指蛋白121抗體
Rap鳥嘌呤核苷酸交換因子2抗體
鳥嘌呤核苷酸交換因子抗體
G蛋白結(jié)合蛋白RAB10抗體
RAN結(jié)合蛋白3抗體
磷酸化周期檢控Rad17蛋白抗體
FHOD3蛋白抗體
酸性核糖體磷蛋白P2抗體
多配體聚糖4抗體
鈉依賴性脯氨酸轉(zhuǎn)運PROT抗體
磷酸化CD19抗體7羥基香豆素3羧(>98.0%(HPLC))pToluoyl chloride25G通用試劑
7二乙氨基4甲基香豆素(>98.0%(GC)(T))Glutaryl chloride25G通用試劑
甲基鈣黃綠素藍水合物[用于配位滴定銅時的指示劑]3,4Dimethoxybenzenesulfonyl chloride1G通用試劑
6,7亞甲二氧基4甲基3馬來酰亞香豆素(>98.0%(HPLC)(N))2,4,6Triisopropylbenzenesulfonyl chlo...25G通用試劑
4甲基6,7亞甲基二氧代香豆素(>99.0 %(GC))Bis(2oxo3oxazolidinyl)phosphonic ch...5G通用試劑
7甲氧基香豆素3羧(>98.0%(GC)(T))3Chlorobenzoyl chloride,≥97.0%25G通用試劑
溶劑綠 7(>85.0%(E))4Chlorobenzoyl chloride100ML通用試劑
磺酰熒光素(>75.0%(HPLC)(T))Dichloroacetyl chloride100G通用試劑
N琥珀酰亞基7羥基香豆素3羧酯(>95.0%(HPLC)(T))4Fluorobenzoyl chloride,≥98.0%25G通用試劑
N琥珀酰亞基7甲氧基香豆素3羧酯(>98.0%(HPLC)(N))Phenyl acetyl chloride,≥98.0%25G通用試劑
5(2氨乙基氨基)1磺水合物(>98.0%(HPLC))oChlorobenzoylchloride,≥98.0%100G通用試劑
四熒光素鹽(>85.0%(HPLC))3Chloro2,2dimethylpropionyl chlorid...25G通用試劑
溶劑紅 48(>98.0%(HPLC)(T))pToluenesulfonyl chloride(PTSC)25G通用試劑
3,4,5,6四氯熒光素Sulfuryl chloride,≥97.0%500G通用試劑
赤蘚紅B(>95.0%(E))Acryloyl chloride, ≥96.0%25G通用試劑