產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	檢測方法	適用樣本	保存溫度	貨號
高爾基體蛋白提取試劑盒	50T/100T	pull-down、co-IP等	動物細胞	2-8℃	BH-D85210

自備儀器和試劑耗材：

1.離心機

1.PBS 緩沖液 

1.離心管

使用方法：
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心
至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
注意事項：
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，
避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

phospho-Androgen Receptor (Ser94) 磷酸化雄激受體抗體 變形桿菌

phospho-Androgen Receptor (Tyr363) 磷酸化雄體抗體 植物乳桿菌

ANKK1 錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體 干酷乳桿菌

phospho-alpha Adducin (Thr445) 磷酸化內(nèi)收蛋白抗體 保加利亞乳桿菌

Annexin A11 膜粘連蛋白11抗體 潮濕纖維單胞菌

Annexin A13 膜粘連蛋白13抗體 產(chǎn)黃纖維單胞菌

phospho-ACTH (Ser168) 磷酸化促腎上腺皮質(zhì)抗體 黃色短桿菌

phospho-AKT1 (Ser246) 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體 球型芽孢桿菌

phospho-AKT1/3 (Tyr473) 磷酸化蛋白激酶B抗體 大腸埃希氏菌

phospho-alpha 1 Sodium Potassium ATPase (Tyr260) 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 金黃色葡萄球菌金黃色亞種

phospho-alpha Adducin(Ser436) 磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體 糞產(chǎn)堿菌

phospho-AMPK alpha 1 (Ser487) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 微黃八疊球菌

CNE-2Z(人鼻咽癌細胞) 5×106cells/瓶×2

COLO 201(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2

CW-2(人結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2

CRT(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

D283 Med(人腦髓母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞) 5×106cells/瓶×2

ECV-304(人臍靜脈內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2

EJ(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2

H-97(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

HCC94(細胞（高分化）) 5×106cells/瓶×2

HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

HEL(人紅白細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2

HELF(人胚肺成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2

HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2

Ishikawa(內(nèi)膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2

L-O2(人正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2

高爾基體蛋白提取試劑盒M1(小鼠白血病細胞) 5×106cells/瓶×2

M14(人黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

MA-891(小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2

操作步驟：

A：組織中提取

1.收集 0.1g 組織，加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑（依據(jù)實驗選擇），冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。

2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中，11000rpm 5min，吸棄上清保留沉淀。

3.至步驟 2。

B：細胞中提取

1.收集約 10 8個細胞，3000rpm 5min（懸浮細胞直接離心，貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等），吸棄上清。

2.至步驟 1。

步驟 1：加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑（依據(jù)實驗選擇），冰上孵育 30min（每 10min 用移液槍 吹打一次），4°C 11000rpm 離心 5min，棄上清。

步驟 2：于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2，置于冰上 30min（每 10min 渦旋一次），4°C 11000rpm 離心 5min，吸取上清于一新離心管中。

步驟 3：加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中，用移液槍輕輕吹勻。

步驟 4：使用 BCA 定量試劑盒定量。

步驟 5：于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer，輕輕吹勻，并應(yīng)用于下游研究。