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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
組織蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
動(dòng)物組織 |
2-8℃ |
BH-D85242 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽1 48T/96T
小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞分裂周期基因(CDC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
彈性蛋白酶4 48T/96T
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小乳腺表皮粘蛋白 48T/96T
小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
魚(yú)尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UDPGT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人膀胱癌抗原(UBC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
組織蛋白提取試劑盒熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-EGFR(Tyr1173) /FITC
熒光素標(biāo)記內(nèi)皮素-1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ET-1/FITC
熒光素標(biāo)記纖維母生長(zhǎng)因子5抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-FGF5/FITC
熒光素標(biāo)記FoxP1(T轉(zhuǎn)錄因子)抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-FoxP1/FITC
熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白6抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-GATA-6/FITC
熒光素標(biāo)記谷氨酸受體4抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-GLUR4/FITC
熒光素標(biāo)記人宮頸癌基因/bri3結(jié)合蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-HCCR-1/FITC
熒光素標(biāo)記促代謝型谷氨酸受體4抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-GRM4/mGluR4/FITC
熒光素標(biāo)記小鼠抗人血紅蛋白單克隆抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-hHb/FITC
熒光素標(biāo)記同源盒蛋白HOXB13抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PSGD/HOXB13/FITC
熒光素標(biāo)記胰島素降解酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-IDE/FITC
藍(lán)蓋玻璃瓶 1000ml 個(gè)
N-Ethylmaleimide N-乙基順丁烯二酰亞胺(NEM) 1g 瓶
DPPH 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼 1g 瓶
Sephadex G-75 medium 葡聚糖凝膠G-75 25g 瓶
D-Arabinose D-阿拉伯糖 10g 瓶
0.4%呂氏堿性美藍(lán)染色液 100ml 瓶
醋酸洗必泰(醋酸己定) 25g 瓶
DL-Selenomethionine DL-硒代蛋氨酸 1g 瓶
JM109感受態(tài) 10×100ul 袋
真基因組DNA提取試劑盒 50T 盒