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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
全血膜蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
動(dòng)物全血 |
2-8℃ |
BH-D85272 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF165)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
白介素-13 48T/96T
大鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
全血膜蛋白提取試劑盒熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-11抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MMP-11/FITC
熒光素標(biāo)記雷帕霉素靶蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-mTOR/FITC
熒光素標(biāo)記腦啡肽酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NEP/FITC
熒光素標(biāo)記神經(jīng)激肽A抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NKA/FITC
熒光素標(biāo)記神經(jīng)肽Y受體2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NPY2R/FITC
熒光素標(biāo)記陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-OCT2 /FITC
熒光素標(biāo)記R-鈣粘附分子抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-R-cadherin /FITC
熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化p53結(jié)合蛋白1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-p53BP1(Ser25/29) /FITC
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記熱休克蛋白27抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-HSP-27/HRP
熒光素標(biāo)記氨基末端激酶2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-JNK2/FITC
熒光素標(biāo)記蛋白激酶B抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PKB/AKT-1 /FITC
Glycine 甘氨酸 500g 瓶
SABC(小鼠/兔IgG)-FITC kit 100-200T 盒
通用RT-PCR試劑盒(M-MLV) 50T 盒
BSA-HRP 1ml 支
4×蛋白上樣緩沖液(含DTT) 10ml 瓶
鴨脾臟分離液試劑盒 200ml/KIT 盒
Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside 香葉木素-7-O-葡萄糖苷 6559-91-7 20mg
Poliumoside 金石蠶苷 94079-81-9 20mg
Hesperidin 橙皮苷 520-26-3 20mg
Corynoxeine 去氫鉤藤堿 630-94-4 20mg