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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
植物葉綠體膜蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 植物 |
|
2-8℃ |
BH-D85324 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
β2糖蛋白1抗體 48T/96T
人球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠促黃體(LH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
白介素-6 48T/96T
總前列腺特異抗原 48T/96T
人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬促黃體生成(LH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人磷酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
植物葉綠體膜蛋白提取試劑盒小鼠β甘露糖苷酶 規(guī)格: 48T Beta Manase(Mouse Beta mannosidase) ELISA Kit
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 規(guī)格: 48T eNOS-3(Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3)ELISA Kit
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II 規(guī)格: 48T GP-II(Mouse Glycogen phosphorylase II)ELISA Kit
小鼠白血病抑制因子受體 規(guī)格: 48T LIFR(Mouse leukemia inhibitory factor receptor) ELISA Kit
兔凝血酶原片段F1+2 規(guī)格: 96T F1+2 (Rabbit prothrombin fragment 1+2) ELISA Kit
毒蛇因子 規(guī)格: 48T Cobra venom factor,CVF ELISA Kit
熒光素標(biāo)記翻譯控制腫瘤蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-TCTP/FITC
熒光素標(biāo)記β-抑制蛋白1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti- Beta-arrestin 1/FITC
熒光素標(biāo)記抗**/血管升壓素抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ADH/AVP/FITC
熒光素標(biāo)記間變型瘤激酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ALK/CD246Ag /FITC
熒光素標(biāo)記N-甲基嘌呤DNA糖基化酶IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-APNG/MPG/FITC
NP-40 LYSIS BUFFER 裂解液 100ml 瓶
茜素紅S染色液(0.2%) 500ml 瓶
2,4-D 2,4-二苯氧乙酸 10g 瓶
Polymyxin B Sulfate 多粘素 B 100mg 支
Cellulase 纖維素酶 1g 瓶
AMPNa2 一磷酸腺苷二鈉 1g 瓶
RNAwait(非凍型組織RNA保存液) 500ml 瓶
羊抗小鼠IgG-RBITC 5ml 支
Paraformaldehyde 多聚甲醛 25g 瓶
(All-in-one,100x)蛋白磷酸酶抑制劑混合物 1ml 瓶