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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
囊泡濃縮試劑盒 |
10T |
|
|
|
BH-D85484 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
牛血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
白血病抑制因子 48T/96T
小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人己糖激酶(HK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
因子受體CD5L 48T/96T
谷胱甘肽硫轉移酶 48T/96T
人胸腺基質(zhì)細胞**素(TSLP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腺五肽(TP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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人上皮誘導中型粘活化因子 規(guī)格: 48T ENA human
人巨噬炎性蛋白-1α 規(guī)格: 48T MIP-1 Alpha
人骨形成蛋白-4 規(guī)格: 48T BMP-4
人胎盤生長素 規(guī)格: 48T PLGH
大鼠III型前膠原肽(N端) 規(guī)格: 48T PIIINP
大鼠Caspase-3 規(guī)格: 48T Rat Caspase-3
大鼠胰島素樣生長因子-Ⅱ 規(guī)格: 48T IGF- II
小鼠P-鈣粘附蛋白 規(guī)格: 48T P-Cadherin
小鼠骨鈣素 規(guī)格: 48T Osteocalcin
人巨噬集落刺激因子受體 規(guī)格: 48T M-CSFR(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor,M-CSFR) ELISA Kit
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