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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
GST標(biāo)簽蛋白純化填料 |
10 ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85496 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
甲狀腺球蛋白抗體 48T/96T
小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素24(IL-24)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
內(nèi)皮素-1 48T/96T
B7同源體3 48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶-2 48T/96T
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血沉(ESR)elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
GST標(biāo)簽蛋白純化填料角蛋白15抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-CK15
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-CNTFR Alpha
促腎上腺皮質(zhì)釋放因子抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-CRF/CRH
周期素F抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Cyclin F
磷酸化雙皮質(zhì)素抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-Doublecortin (Ser297)
死亡受體4抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-DR4/APO2
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-ERAB
磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-phospho-EGFR(Tyr1068)
磷酸化埃茲蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-Ezrin (Thr567)
纖維生長因子結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-FGFBP
麻疹病毒融合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Measles virus fusion protein
BDS培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250 用于培養(yǎng)擬桿
葡萄糖瓊脂 特價供應(yīng) 250 用于細(xì)的綜合生化試驗(yàn)
Andrade氏糖類肉湯 現(xiàn)貨促銷 250 用于細(xì)的糖發(fā)酵試驗(yàn)
Korser氏枸椽酸鹽肉湯 特價供應(yīng) 100 用于細(xì)枸椽酸鹽試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
Endo 培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250 用于大腸群的確診試驗(yàn)(APHA)
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茜素-β-半乳糖苷瓊脂 特價供應(yīng) 250 用于食品、飲料和飲用水中大腸群快速檢測和計(jì)數(shù)(GB/T)
Tergitol-7 瓊脂 現(xiàn)貨促銷 250 用于大腸群的鑒定(NMKL)