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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
20×TBS(pH8.0,Tris緩沖鹽溶液) |
500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85584 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因于α(TGFα)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
吸引素 48T/96T ATM Attractin
補(bǔ)體蛋白5 48T/96T
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
降鈣素 48T/96T
bruton酪氨酸激酶 48T/96T
20×TBS(pH8.0,Tris緩沖鹽溶液)磷酸化孕受體抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190)
球蛋白G Fc段受體I 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD64/IGFR1
指狀蛋白RET抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-RET/C ret
S100A13抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-S100A13
磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)
磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)
類泛素蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-SUMO 1
類固醇受體輔助活化因子-3 規(guī)格: 0.2ml Anti-SRC3/KAT13B/AIB1
轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-TCF7L2
視黃酸受體應(yīng)答蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Rarres3/TIG3
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-TRAF6
丙二酸鈉培養(yǎng)基 250g/瓶 用于細(xì)生化鑒定現(xiàn)貨促銷
蛋白胨水培養(yǎng)基 250g/瓶 用于細(xì)靛基質(zhì)試驗(yàn)特價(jià)供應(yīng)
精氨酸雙水解酶試驗(yàn)培養(yǎng)基 250g/瓶 用于細(xì)的精氨酸雙水解酶試驗(yàn)現(xiàn)貨促銷
鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基 250g/瓶 用于細(xì)的鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)特價(jià)供應(yīng)
氨基酸脫羧酶試驗(yàn)對(duì)照培養(yǎng)基 250g/瓶 用于細(xì)的氨基酸試驗(yàn)對(duì)照現(xiàn)貨促銷
營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA) 250g/瓶 用于落總數(shù)測(cè)定、種純化和傳 代現(xiàn)貨促銷
緩沖葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 250g/瓶 用于細(xì)的 MR、VP 試驗(yàn)特價(jià)供應(yīng)
平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA) 250g/瓶 用于細(xì)總數(shù)測(cè)定特價(jià)供應(yīng)
R2A 瓊脂 250g/瓶 用于水中落總數(shù)測(cè)定現(xiàn)貨促銷