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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
SDS-PAGE濃縮膠緩沖液 |
500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85618 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
人D-乳酸(D-LAC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人表皮生長因子受體2(Her2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊血小板衍化生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 組裝/原裝
豬黃嘌呤氧化酶(XOD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝甲狀腺素(T4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗鼠抗體(HAMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖化白蛋白(GA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β2微球蛋白 48T/96T
GTP酶活化蛋白 48T/96T
SDS-PAGE濃縮膠緩沖液熒光素標記腦啡肽抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PENK/Enkephalin A/FITC
熒光素標記磷酸化p21激活激酶4、5、6抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Phospho-PAK4 (Ser474)/PAK5 (Ser602)/PAK6 (Ser560) /FITC
熒光素標記磷酸化蛋白激酶C亞性抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-PKA C (Thr197)/FITC
熒光素標記平足蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Podoplanin Protein/FITC
熒光素標記抗PSP抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PSP/FITC
熒光素標記抗核糖核苷酸還原酶1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-RRM1/FITC
熒光素標記膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白SLC40A1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-SLC40A1/FPN1/FITC
熒光素標記分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-SFRP1/FITC
熒光素標記磷酸化Src原癌基因抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-Src (Tyr418)/FITC
熒光素標記抗突觸素抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-SAP-1/FITC
熒光素標記四分子交聯(lián)體5抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Tetraspan5/FITC
乙基紫疊氮鈉肉湯 250(g)
孟加拉紅(虎紅)培養(yǎng)基 250(g)
孟加拉紅(虎紅)培養(yǎng)基 1000(g)
KF鏈球瓊脂 100(g)
GVPC添加物 5支/盒
KF鏈球瓊脂 100(g)
胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA) 250(g)
BCYE瓊脂基礎(chǔ) 100(g)
GVPC瓊脂基礎(chǔ) 100(g)
改良平板計數(shù)瓊脂(MPCA) 250(g)