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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
聚乙烯醇甘油封片劑 |
5ml/ 10ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85630 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
透明質(zhì)酸 48T/96T
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人載脂蛋白C3(APO-C3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝膽固醇(CH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1 48T/96T
甲型肝炎病毒抗體IgG 48T/96T
小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗殺通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠間羥去甲腎上腺素(NMN)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
聚乙烯醇甘油封片劑熒光素標(biāo)記抗凝血酶Ⅲ抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ATH III /FITC
熒光素標(biāo)記 Bax 蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Bax protein/FITC
熒光素標(biāo)記骨成型蛋白受體1A抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-BMPR-1A/FITC
熒光素標(biāo)記抗鈣連蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CANX/FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化原癌蛋白CBL2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-CBL2(Tyr731) /FITC
熒光素標(biāo)記CD3蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD3/FITC
紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記CD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor /RBITC
熒光素標(biāo)記抗CD38抗體(小鼠、大鼠)IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD38(mouse, rat)/FITC
熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化分裂周期蛋白25抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-cdc25A ( Ser178) /FITC
熒光素標(biāo)記ChAT抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ChAT/FITC
熒光素標(biāo)記緊密連接蛋白4抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CLDN4/Claudin 4/FITC
嗜鹽選擇性瓊脂 250(g)
氯化鈉血瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
霍亂雙糖鐵瓊脂 250(g)
T1N0肉湯 250(g)
改良纖維二糖多粘素B多粘素E瓊脂基礎(chǔ)(mCPC) 250(g)
T1N1瓊脂 250(g)
嗜鹽性試驗(yàn)培養(yǎng)基 250(g)
T1N3肉湯 250(g)
精氨酸葡萄糖斜面瓊脂(AGS) 100(g)
氨芐青霉素麥康凱瓊脂基礎(chǔ) 250(g)